高三生物专题复习精品课件第三节基因工程简介.pptVIP

发明PCR，公司奖励10,000美元奖金 专利卖给Hoffmann-La Roche公司卖了3亿美元 Mullis得了1993年诺贝尔化学奖 利用PCR技术扩增目的基因 PCR扩增上亿个拷贝（几个小时），而癌症细胞以高复制能力而著称，完成同样的多制工作一个癌症细胞需要整整一个月。 化学合成法：前提 a.如果目的基因的全序列是已知的，用化学合成法直接合成。 b.DNA自动合成仪可合成不超过50个碱基寡聚核苷酸单链。 c.用于核酸杂交的探针，分子克隆的人工接头，PCR扩增的引物。 d.由单链寡聚核苷酸通过退火直接装备双链DNA片段或基因。 基因文库，理论上它含有某一生物染色体的所有DNA片段，包括基因编码区和间隔区DNA。由鸟枪法和cDNA法构建。鸟枪法构建的为基因组文库 (Genomic Bank)。 cDNA文库,含有生物体的全套蛋白质编码序列,不含DNA调控序列从cDNA文库筛选蛋白质编码基因，比从基因文库筛选要简捷。 目的基因与运载体的结合——表达载体的构建 目的基因 启动子和终止子 标记基因 核糖体结合位点的强弱 克隆基因的拷贝数 所表达的蛋白质的最终细胞定位 翻译的效率 所表达的蛋白质的稳定性 目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，遗传到下一代，同时使目的基因表达发挥作用。 什么是强启动子？ 与RNA聚合酶结合能力强,因此，其介导的基因转录水平高、频繁 持续强启动子表达的弱点 能量枯竭导致宿主细胞生长受阻 质粒容易丢失 将目的基因导入受体细胞 目的基因导入微生物细胞：细菌转化五个步骤 1）感受态的形成 　 感受态细胞能分泌一种小分子量的激活蛋白，感受因子，诱导特征性蛋白（细胞溶素）合成，使细胞壁部分溶解,暴露膜上DNA结合的蛋白。 2）转化因子结合 受体菌膜上的结合蛋白与转化因子的双链DNA结构特异结合。单链DNA,RNA,DNA-RNA杂合双链都不能结合在膜上。 3）转化因子吸收 双链DNA结构与蛋白特异结合后，激活核酸酶，一条链被降解，另一条被吸受到受体菌中。 4）整合复合物前体形成 整合复合物前体：进入受体细胞单链DNA与蛋白特异结合。保护单链DNA不被酶降解。 5）转化因子单链DNA整合 单链DNA通过同源重组，置换受体染色体同源区域，形成异源杂合双链DNA结构。 将目的基因导入植物细胞 土壤农杆菌法 基因枪法 花粉管通道法 1987年，周光宇中国的转基因棉花 原理不明 土壤农杆菌法 冠瘿病 侵染双子叶植物 基 因 枪 法 打一枪即可10000个整合细胞/枪 火药、气压等 300-600米/秒 DNA随机插入，原理不明 目的基因导入动物细胞 如：显微注射法 DNA损失少 无需选择标记基因整合效率高 目的基因的检测和表达 基因克隆→用于在选定的host中表达 但是 克隆的基因不一定能表达 克隆载体不一定是好的表达载体 目的基因是否进入受体细胞，你如何去察觉？ 1。抗药性筛选法 2.营养缺陷性筛选法 载体分子携带营养成分（氨基酸，核苷酸）的生物合成基因，受体细胞基因突变，不能合成营养物质。两者构成营养缺陷。 在缺少营养物质的培养基上受体细胞不存活，存活的是转化子。 3.显色模型筛选法 LacZ,?-半乳糖苷酶基因，用于筛选重组子。 4.植物细胞中的报告基因：颜色、发光、抗生素、除草剂等 * * 第三节基因工程简介 知识目标： 1．? 简述基因工程的概念 2．? 简述基因操作的三种基本工具的作用 3．? 简述基因工程的原理和基本操作程序 4．? 举例说出基因工程所取得的成果和发展前景 基因工程的基本内容 基因操作的工具 基因操作的基本步骤 基因工程的成果与发展前景 基因工程与医药卫生 基因工程与农牧业、食品工业 基因工程与环境保护 新课标：普通高中课程标准实验教科书 科技探索之路 基础理论和技术的发展催生了基因工程 1.1DNA重组技术的基本工具 1.2基因工程的基本操作程序 拓展视野 历史不能忘记中国科学家对PCR的贡献 1.3基因工程的应用 拓展视野 神奇的基因芯片 1.4蛋白质工程的崛起 选修3 现代生物科技专题 专题1 基因工程 基础理论和技术的发展催生了基因工程 基因工程理论上三大突破： （1）DNA是遗传物质—— 1943 美 Avery 肺炎双球菌的转化实验等。 （2）DNA双螺旋结构——1953 美 Watson 英Crick DNA双螺旋模型；1958M.MeselsonF.Stahl用实验证明了半保留复制，不同基因具有相同的物质基础。 （3）64个密码子破译和中心法则的确立—— 1958 Watson and Crick 提出中心法则，阐明了遗传信息的流动方向，多肽与基因之间存在对应关系。 密码形式——使遗传