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- 2019-04-21 发布于湖北
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细胞工程跟核移植技术跟动物克隆资料
核受体细胞选择: 去核卵母细胞常常作为核移植的受体细胞。 选择的生物学依据(或为何选择卵细胞为核移植受体细胞): (1) 核受体细胞的准备 20 在卵母细胞的细胞质含有某种特定的因子,可以使 移植核中所含有的基因表达程序发生重新排列。 使已经分化了的细胞重新回到发育过程的原点, 同受精卵一样开始个体发育过程。 卵母细胞的来源: 用激素对雌体进行超排处理,从输卵管冲出体内 成熟的 MII 卵母细胞。 从屠宰场收集卵巢,吸出滤泡中的卵丘—卵母细胞 复合体(COCs),在体外培养成熟后作为受体。 冷冻保存的卵母细胞 (1) 核受体细胞的准备 21 卵母细胞的去核处理: (1) 核受体细胞的准备 22 将MII卵母细胞置于含细胞松弛素(5-7.5ug/mL)的 培养液处理10-20min. 显微镜下以持卵管吸住卵母细胞. 以尖端去核针刺穿透明带,吸出第一极体和极体下 1/3胞质. 供体细胞核具备的条件: 必须是完整的二倍体,保持有供体动物完整的 基因组 供体细胞核必须能够在受体细胞质的作用下,产生 细胞分化过程的逆转,能重新完成从受精到发育成 一个正常动物个体的全过程。 (2) 核供体细胞的准备 23 供体细胞类型: 胚胎卵裂球细胞 体细胞 胚胎干细胞和胎儿成纤维细胞
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