高效液相色谱简介及操作.ppt

三、高效液相色谱基本操作步骤 （1）检查电源线连接是否正确后打开电源开关 （2）泵体及流路内的气泡排除 （3）正确连接色谱柱 注意流向标志，切勿反接 * （4）系统平衡 第一步：先用甲醇或乙腈冲洗流路约20分钟，平衡活化色谱柱，并赶走管路中的杂质和水分。 第二步：平衡色谱柱 方法一：若流动相为有机相与水相的混合物，则第一步完成后，按照分析样品的需要调节有机相与水相的比例后冲洗流路约30分钟后，待基线走平后即可进样。 方法二：若流动相中含有缓冲盐溶液、有机/无机酸，则第一步完成后，先用95%的去离子水冲洗流路约20分钟后，再按照分析样品的需要调节流动相的比例，冲洗流路约30分钟，待基线走平后即可进样。 * （5）色谱柱平衡后，打开检测器（开灯） （6）测定样品 （7）清洗仪器 色谱柱及流路清洗 进样阀清洗 进样针清洗 * 四、主要注意事项 1 泵使用的注意事项 防止任何固体微粒进入泵体（用0.22 um或0.45 um的微孔滤膜过滤） 流动相不应含有任何腐蚀性物质，含有缓冲盐的流动相不应保留在泵内更不允许留在柱内。 泵工作时防止溶剂瓶内的流动相用完，否则空泵运转一是会使大量空气进入柱内柱床崩塌、也会磨