丙型肝炎检测的课件内容.pptVIP

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  • 2019-04-20 发布于山东
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(四)检测结果的解释 1、阴性结果的解释 由于目前抗原检测试剂的灵敏度较低,最灵敏的检测试剂只能达到相当于500 IU/ml水平的HCV RNA,因此阴性的结果并不能排除HCV现症感染的可能。 2、阳性结果的解释 现阶段,HCV抗原阳性仅作为HCV感染的辅助诊断依据,不能据此确诊。特别是对处于“灰区”的阳性结果,需要结合临床表现及HCV RNA、抗-HCV等检测结果来解释。监测病程进展或抗病毒治疗效果应进行HCV抗原的定量检测 。 (二)HCV核酸检测的方法 1、RT-PCR检测技术 传统PCR定性检测HCV RNA需要三个步骤:①对待测样品进行处理:通过裂解、纯化,提取样品中的HCV RNA作为PCR扩增的模板;②采用逆 转录PCR(RT-PCR)技术对提取到的HCV RNA进行扩增;③检测PCR扩增产物,检测方法包括凝胶电泳和PCR-酶联免反应(PCR-ELISA)等。 2、TMA检测技术 TMA是一种利用MMLV逆转录酶和T7 RNA聚合酶2种酶的共同作用,在等温条件下来扩增RNA的反应系统。TMA使用的引物含有T7 RNA聚合酶 结合位点,使得反转录合成的cDNA可以作为T7 RNA聚合酶的模板,在T7 RNA聚合酶的作用下合成大量的RNA拷贝。扩增出来的RNA重新进入TMA 循环,成为下一轮复制的模

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