机械牵张对人肺上皮细胞转分化的影响及其作用机制研究-内科学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 HYPERLINK \l _bookmark0 缩略词表 1 HYPERLINK \l _bookmark1 中文摘要 3 HYPERLINK \l _bookmark2 英文摘要 5 HYPERLINK \l _bookmark3 前 言 7 HYPERLINK \l _bookmark4 材料与方法 10 HYPERLINK \l _bookmark5 一．细胞培养 10 HYPERLINK \l _bookmark6 二．牵张模型的建立 12 HYPERLINK \l _bookmark7 三．实时荧光定量 PCR 检测 mRNA 表达变化 14 HYPERLINK \l _bookmark8 四．Western blot 检测蛋白表达变化 18 HYPERLINK \l _bookmark9 五．免疫荧光双染色 24 HYPERLINK \l _bookmark10 六．Midkine siRNA 转染及鉴定 25 HYPERLINK \l _bookmark11 结 果 29 HYPERLINK \l _bookmark12 第一部分：机械牵张对人肺上皮细胞转分化的影响 29 HYPERLINK \l _bookmark13 1． 不同机械牵张对 BEAS-2B 细胞形态的影响 29 HYPERLINK \l _bookmark14 2． 不同机械牵张对 BEAS-2B 细胞 EMT 标志物 mRNA 水平的影响 30 HYPERLINK \l _bookmark15 3． WB 检测不同机械牵张对 BEAS-2B 细胞 EMT 标志物表达的影响 32 HYPERLINK \l _bookmark16 4. 免疫荧光检测机械牵张对 BEAS-2B 细胞 EMT 标志物表达的影响 33 HYPERLINK \l _bookmark17 第二部分：机械牵张对 Midkine 表达的影响 35 HYPERLINK \l _bookmark18 1． 不同机械牵张对 BEAS-2B 细胞 Midkine mRNA 表达水平的影响 35 HYPERLINK \l _bookmark19 2． WB 检测不同机械牵张对 BEAS-2B 细胞 Midkine 蛋白表达的影响 36 HYPERLINK \l _bookmark20 3． 免疫荧光检测机械牵张对 BEAS-2B 细胞 Midkine 蛋白的影响 36 HYPERLINK \l _bookmark21 4． 不同机械牵张对 BEAS-2B 细胞 ACE2 mRNA 表达水平的影响 37 HYPERLINK \l _bookmark22 第三部分：Midkine 在机械牵张诱导肺上皮细胞转分化中的作用 38 HYPERLINK \l _bookmark23 1． 不同牵张强度对肺上皮细胞 MK 及 EMT 标志物表达的影响 38 HYPERLINK \l _bookmark24 2． 有效干扰 BEAS-2B 细胞 Midkine 表达的 siRNA 的筛选 39 HYPERLINK \l _bookmark25 3． 沉默 MK 后对机械牵张 BEAS-2B 细胞 EMT 相关蛋白表达的影响 40 HYPERLINK \l _bookmark26 讨 论 42 HYPERLINK \l _bookmark27 第一部分 机械牵张对肺上皮细胞转分化的影响 42 HYPERLINK \l _bookmark28 第二部分 不同条件机械牵张对 Midkine 表达的影响 45 HYPERLINK \l _bookmark29 第三部分 Midkine 在机械牵张诱导肺上皮细胞 EMT 中的作用 47 HYPERLINK \l _bookmark30 小 结 49 HYPERLINK \l _bookmark31 结 论 49 HYPERLINK \l _bookmark32 参考文献 50 HYPERLINK \l _bookmark96 附 录 64 HYPERLINK \l _bookmark97 致 谢 65 HYPERLINK \l _bookmark98 学位论文原创性声明 66 HYPERLINK \l _bookmark99 学位论文知识产权权属声明 66 HYPERLINK \l _bookmark100 关于学位论文使用授权的说明 66 缩略词表 缩略词表 英文缩写 缩略词表 英文全称 中文全称 ARDS Acute Respiratory Distress Syndrome 急性呼