低剂量辐射对小鼠血清蛋白差异表达的影响.PDF

第 32 卷 第 1 期 辐 射 研 究 与 辐 射 工 艺 学 报 Vol.32, No.1 2014 年 2 月 J. Radiat. Res. Radiat. Process. February 2014 低剂量辐射对小鼠血清蛋白差异表达的影响 陈 伟 何 颖 沈先荣 蒋定文 王庆蓉 侯登勇 刘玉明 李珂娴 刘 琼 钱甜甜 （海军医学研究所 上海 200433 ） 摘要 应用蛋白质组学方法筛选对低剂量 射线敏感的蛋白质,并采用双向凝胶电泳和基质辅助激光解析飞行 时间串联质谱技术分离、鉴定不同低剂量 射线导致的小鼠血清差异表达蛋白。不同低剂量  射线照射后,对 实验组与对照组的血清双向电泳图谱进行比较分析，通过质谱鉴定得到 7 个差异表达点，分别是载脂蛋白 C-III、珠蛋白、腮腺分泌蛋白、2 巨球蛋白前体、转甲状腺蛋白晶体结构H 链、C1qc 蛋白和丛生蛋白。提 示低剂量  射线辐照能导致小鼠血清中某些蛋白表达发生变化。 关键词 低剂量辐射，血清蛋白，差异表达，蛋白质组学，小鼠 中图分类号 R811.5, TL71 以往对γ 射线辐照的生物效应研究主要集中在 研究所实验动物中心普通级小鼠实验室内，室温 大剂量一次性照射引起的生物体损伤，包括对造血 18−24 ℃，12 h 照明，12 h 黑暗。饲以小鼠标准饲 系统的损伤、对免疫系统的损伤以及对代谢系统的 料，笼内自由饮用自来水。动物按体重随机分为 4 损伤等。近年来，随着核工业的发展，有可能接受 组，分别为正常对照组、0.1 Gy 照射组、0.5 Gy 照 低剂量辐射(LDR)的人群数量逐年增加[1] 。目前国内 射组和 1.0 Gy 照射组，每组 10 只。各照射组在海 外对低剂量辐射生物学效应的机制研究不多，并且 军医学研究所辐照室进行照射，60Co γ 射线，单次 多集中于单个或少数几个基因或蛋白质，不能完全 照射，剂量率为 500 mGy/h ，剂量分别为 0.1、0.5 地、系统地、动态地解释低剂量辐射生物学效应的 和 1.0 Gy。 全部过程[2] 。蛋白质组学技术的飞速发展为其研究 1.2 主要仪器与试剂 提供了新的思路和技术平台。本研究将小鼠暴露于 一定剂量范围的低剂量 γ 射线，建立 γ 射线辐照损 酶标仪（美国 Thermo Electron 公司），紫外可 伤动物模型，利用双向凝胶电泳(2-DE)结合基质辅 见光分光光度计（上海奥谱勒仪器有限公司，759 助激光解析飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS)分 UV spectrophotometer ），MEK-5216K 型血细胞分析 离并鉴定不同低剂量 γ 射线辐射作用下小鼠外周血 仪（日本 Nihon Kohden 公司），Ettan IPGphor 3 等 血清蛋白的表达变化，寻找潜在的低剂量电离辐射 电聚焦系统、ImageQuant 300 图像分析系统（美国 损伤生物标志物，为低剂量 γ 射线的防护提供理论 GE 公司），SE 600 垂直电泳仪（美国 Amersham 依据。 Biosciences 公司）。IPG 固相线性PH 梯度预制胶条 (PH3-10) 、IPG buffer 和覆盖液（美国 Amersham 1 材料与方法