环磷酰胺对睾丸支持细胞间隙连接蛋白43表达的影响-临床医学(泌尿外科)专业论文.docxVIP

汕头大学医学院硕士学位论文 汕头大学医学院硕士学位论文 万方数据 万方数据 学位论文知识产权声明 本人在就读研究生期间所完成的学位论文以及相关结果，知识产权归属 汕头大学医学院。本人在毕业离校前会将有关的研究资料和结果全部上交导 师，离校后发表或使用学位论文或与学位论文直接相关的学术论文或成果时， 须征得导师及导师所在单位的同意，并要求署名单位仍为汕头大学医学院。 本人不得以本论文的研究成果申报研究课题。导师和导师单位可以将学位论 文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描 等复制手段进行保存、汇编学位论文，可以公布（包括刊登）论文的全部或 部分内容。导师及导师所在单位享有发表学位论文、申请成果和专利的权利。 注：保密的学位论文在解密后适用本声明。 研究生签名： 日期： 年 月 日 导师签名： 日期： 年 月 日 中文摘要 目的： 研究环磷酰胺对小鼠睾丸支持细胞间隙连接蛋白 Cx43 表达的影响，探讨环磷酰胺可 能的生殖毒性机制。 实验方法： 选取 45 只 5-6 周龄雄性昆明（KM）小鼠随机分为对照组、大剂量组、小剂量组，每 组 15 只 。 大 剂 量 组 及 小 剂 量 组 分 别 腹 腔 注 射 环 磷 酰 胺 (20mg·kg-1·d-1 ) 及 (10mg·kg-1·d-1 )，连续 5 天；对照组腹腔注射同等剂量生理盐水。于毒染结束后第 1 天， 第 2 周，第 4 周时各组随机抽取 5 只小鼠，检查小鼠精子畸形率；通过 HE 染色观察小鼠 睾丸组织形态学变化，并应用免疫组化技术检测及评估各组睾丸支持细胞间隙连接蛋白 43 的表达情况。 结果： 睾丸组织切片显示：环磷酰胺毒染后睾丸生精上皮部分萎缩，层次减少；各级生精细 胞排列不规则，数目减少，生精细胞间隙增大，其损伤程度随着毒染剂量的增加、药物体 内蓄积时间的延长而加重。环磷酰胺可使小鼠精子畸形率增加，小剂量组精子畸形率未见 明显变化（P＞0.05），大剂量组精子畸形率在毒染后第 1 天，第 2 周差异无统计学意义， 到毒染第 4 周差异有显著统计学意义（P＜0.01）。免疫组织化学染色结果显示：不同染毒 剂量、不同药物体内蓄积时间对小鼠睾丸支持细胞 Cx43 表达有影响，差异有统计学意义 （P＜0.01）；睾丸支持细胞 Cx43 的表达强度随着环磷酰胺体内蓄积时间的延长、毒染剂 量的增加而降低。 结论： I (20mg·kg-1·d-1 )的环磷酰胺连续 5 天腹腔注射毒染可建立理想的小鼠雄性生殖损伤 模型。环磷酰胺能抑制睾丸支持细胞间隙连接蛋白 43 的表达，推测是环磷酰胺导致雄性 生殖毒性的可能机制之一。 关键词：环磷酰胺；睾丸支持细胞；连接蛋白43；免疫组化； II ABSTRACT Objective: To study the effect of cyclophosphamide on the expression of connexin 43 in mice Sertoli cells, and investigate the reproductive toxicity mechanism of cyclophosphamide. Methods: 45 male Kunming mice，5 to 6 weeks old，were randomly divided into control group、low dose group and high dose group. The high dose group and low dose were respectively injected cyclophosphamide (20mg·kg-1·d-1 ) and (10mg·kg-1·d-1 ) intraperitoneally for five days. The control group were injected the same dose of normal saline intraperitoneally. To select 5 mice randomly from each group on day 1、week 2 and week 4 after poisoned and to check the sperm deformity rate in mice. Using HE staining to observe the mice testicular histology change and to detect the expression connexin 43 in mice Sertoli cells by immunohistochemical. Result： Th