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- 2019-04-21 发布于山东
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实验四血糖的测定及激素对血糖浓度的影响一 实验目的掌握GOD-POD法测定血糖的原理及方法。 观察胰岛素,肾上腺素对血糖浓度的影响。了解动物实验的基本知识和兔耳缘静脉取血的方法。二 原理(2) 激素对血糖浓度的影响 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢被过氧化物酶(POD)催化释放初生态氧,氧又对与色原性氧受体4-氨基安替比林偶联的酚氧化,并与4-氨基安替比林结合生成红色醌类化合物。二 原理(2) 显色原理 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢被过氧化物酶(POD)催化释放初生态氧,氧又对与色原性氧受体4-氨基安替比林偶联的酚氧化,并与4-氨基安替比林结合生成红色醌类化合物。 葡萄糖+O2+H2O GOD 葡萄糖酸+H2O2 4-氨基安替比林+酚+H2O2 POD 红色醌类化合物+4H2O 葡萄糖越多,生成的醌类物质就越多,颜色就越深,通过所讲过的比色法,求出它的葡萄糖含量,即血糖浓度。(标准管法)三 操作1.准备抗凝试管:首先放入试管一小勺抗凝剂(草酸钠)。2.分组。称重:Kg,共有四只兔子,两只注射胰岛素,两只注射肾上腺素。兔子抓取方法:一手抓取颈部皮肤,另一只手托臀部,把它放在天平上称重。 操作3. 注射前取血:一般多以心脏取血的方式进行。 操作4.注射激素:抓住兔子,肚皮朝上,在腹部的皮下注射,注意要抓紧兔耳以免被咬住,方法是掂起皮肤,刺入皮下有落空感,然后缓慢注入激素。首先注射胰岛素0.75 mg/kg(注意记录时间)然后注入肾上腺素0.5 mg/kg,并记录时间。5.制备无蛋白血虑液:这是注射前的血液,在胰岛素等待一个小时,肾上腺素等待半个小时期间制备注射前无蛋白血虑液。方法:蛋白沉淀剂4ml+全血0.2ml混匀,室温放置7分钟后,在漏斗上过滤,这时标记为注射前无蛋白血滤液。 操作6.注射后再次取血7.再制备无蛋白血虑液:标记为注射后8.比色:最后我们用标准管法来测定血糖浓度, 按表操作:加入物(ml) 测定管(注射前) 测定管(注射后) 标准管 空白管去蛋白血滤液 0.5 0.5 处理后的葡萄糖 0.5标准应用液 蛋白沉淀剂0.5酶酚混合试剂 3 3 3 3 混匀,置37℃水浴15分钟调波长为505nm,以空白管调零,分别读取A测A标,根据标准管法求测定管血糖浓度。 四 结果与计算C测(mmol/l)= (A测/A标)×5 mmol/L (5为葡萄糖标准应用液浓度值)通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变化情况。五 分析 (1) 对家兔而言血糖正常值:2.8-5.2 mmol/L,验证是否在此范围。 (2) 从实验结果来验证胰岛素降低血糖以及肾上腺素升高血糖的作用。thankyou扁平化蓝色实用课堂学术汇报Flat blue practical classroom academic report汇报人:***导师:**研究背景基本概念PPT模板下载:/moban/行业PPT模板:/hangye/ 节日PPT模板:/jieri/ PPT素材下载:/sucai/PPT背景图片:/beijing/ PPT图表下载:/tubiao/优秀PPT下载:/xiazai/ PPT教程: /powerpoint/Word教程: /word/ Excel教程:/excel/ 资料下载:/ziliao/ PPT课件下载:/kejian/ 范文下载:/fanwen/试卷下载:/shiti/ 教案下载:/jiaoan/ PPT论坛: 0201Basic ConceptionResearch Background目录0304实际应用理论研究未来展望试验方法CONTENTSFuture ProspectExperimental MethodPractical ApplicationTheoretical Research0506研究背景PARTONEPPT模板下载:/moban/行业PPT模板:/hangye/ 节日PPT模板:/jieri/ PPT素材下载:/sucai/PPT背景图片:/beijing/ PPT图表下载:/tubiao/优秀PPT下载:/xiazai/ PPT教程: /powerpoint/Word教程: /word/ Excel教程:/excel/ 资料下载:/ziliao/
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