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初始污染菌检测 初始污染菌检测：目前使用标准GB 15980（一次性使用医疗卫生标准）。本标规定了一次性使用医疗用品灭菌、消毒前、后的卫生标准。本标准对一次性使用医疗用品（包括灭菌的和消毒的一次性使用医疗用品）生产、装配，包装车间等生产过程和生产工人手提出卫生的质量控制。 引用标准：GB7918.2、GB8368、GB8369、中华人民共和国药典。 指标含义 测定检品细菌总数可用来判明检品细菌污染的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、生产人员的卫生状况，是对检品进行卫生学评价的综合依据。 方法主要步骤 采样供试液制备 采样 供试液制备 培养 菌落计数 供试液制备 1.供试品是敷料、可以破坏性类可用无菌手续称取10g,放入100ml灭菌生理盐水中充分振荡后取样。作为1：10的供试液。 2.供试品是液体取10ml加至100ml灭菌生理盐水中充分振荡后取样。作为1：10的供试液。 3.对供试品不能采用破坏性取样可用浸有无菌生理盐水拭子涂抹采样，被采表面积为100cm2.加入灭菌生理盐水100ml。作为1：10的供试液。 4.可用破坏性方法取样供试品：（参照中华人民共和国药典2005年规定进行) 5、采样数量：各类产品每批随机抽取10件样品。 6、检验方法：将每样取5份平行样，参照GB7918.2规定进行。 初始污染菌检测 7、结果计算公式： 菌数/每件次（或g） = 注意事项： 供试品的取样必须在万级环境中100级净化条件下，无菌操作，防止污染。 应严格遵守无菌操作，同时消除抑菌成份的干扰。 ? 1：10 1:100 空白 对照 37℃48h菌落计数 37℃48h菌落计数 1＃ 2＃ 1＃ 2＃ Ⅰ ? ? ? ? ? Ⅱ ? ? ? ? Ⅲ ? ? ? ? Ⅳ ? ? ? ? Ⅴ ? ? ? ? 菌落均值 ? ? ? ? 将已经凝固的平板倒置于37℃培养箱中，一般培养48±2h。 计数方法：将平板置菌落计数器或从平板的背面直接以肉眼用标记笔点计，以投射光衬以暗色背景，仔细观察，计数。必要时可以借助于放大镜、菌落计数器。 菌落特征： ⑴形态特征：常为白色、灰白色或灰色，亦有淡褐色、淡 黄色（如果培养基中加入0.1%TTC试剂，菌落为红色） ⑵边缘整齐或不整齐，表面有光滑、粗糙，皱褶、突起或扁平。 ⑶大小差异很大。 菌落计数基本规则 1、选取平均菌落数在30～300之间的稀释级作为报告菌落数测定范围。 如只有1个稀释级平均菌落数在30～300之间，则将稀释级的菌落数乘以稀 释倍数报告。 2、如有两个相邻稀释级的平均菌落数在30～300之间，则先计算两稀释级菌落数的比值。 比值= 当比值≤2时，则以2个稀释级的平均菌落数均值报告。当比值2时，则以低稀释级的平均菌落数乘以稀释倍数报告。 3、如各稀释级平均菌落数均在300以上，则按最高平均菌落数乘以稀释倍数报告；如各稀释级平均菌落数均在30以下，则按最低平均菌落数乘以稀释倍数报告。 菌落计数基本规则 4、如各稀释级平均菌落数均不在30～300之间，则以最 接近30或300的稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告。 5、如各稀释级平均菌落数均无菌落生长或最低稀释级平 均菌落数小于1时，应报告菌数为10个/g或ml。 6、如有3个稀释级平均菌落数均在30～300之间，则以后2级计算级间比值报告。 7、菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告。大于100时，采用二位有效数字，在两位有效数值后面，应以四舍五入法计算。在报告菌落数为“不可计”时，应表明样品的稀释度。 细菌计数结果及报告方法