第十章 动物细胞融合和单克隆抗体.pptx

第十章 动物细胞融合和单克隆抗体;一、动物细胞融合（细胞杂交）;发展简史;（一）细胞融合的方法;2. 化学法：NaNO3诱导融合；高pH高Ca2+离子诱导融合；聚乙二醇（PEG）诱导融合；高pH高Ca2+的聚乙二醇诱导融合 聚乙二醇（PEG），分子量大于200小于6000者均可用作细胞融合剂。PEG经高压灭菌后，与温热的Engle氏液混合。一般选用分子量为4,000，常用浓度为50%，pH8.0～pH8.2（用10%NaHCO3调整），分子量小的PEG，融合效应差，又有毒性，分子量过大，则粘性太大，不易操作。 ;3. 物理法：电融合法 在直流电脉冲的诱导下，细胞膜表面的氧化还原电位发生改变，使异种细胞粘合并发生质膜瞬间破裂，进而质膜开始连接，直到闭和成完整的膜，形成融合体。 优点：融合率高、重复性强、对细胞伤害小； 装置精巧、方法简单、可在显微镜下观察或录像观察融合过程； 免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过???可控性强。 ;（二）动物细胞融合过程;过程：;（三）细胞融合的意义 ⒈理论上说任何细胞，都有可能通过体细胞杂交而成为新的生物资源。这对于种质资源的开发和利用具有深远的意义。 ⒉融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制的限制，为远缘物种间的遗传物质交换提供了有效途径。 ⒊体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外遗传系统，在杂种的分裂和增殖过程中双亲的叶绿体、线粒体DNA亦