血培养系统中肺炎链球菌的自溶与鉴定.pdfVIP

·６４１· 文章编号：１００１７６４Ｘ（２０１３）１１　　 　　　 ·质量管理研究 · 连续监测血培养系统中肺炎链球菌的自溶与鉴定 １ ２ ３ ４ ２ ２ １，４ 蔡婷婷 ，屈平华 ，穆小萍 ，张磊 ，林冬玲 ，陈茶 ，吴尚为 （１．天津医科大学检验学院，天津３０００７０；２．广 东省中医院检验医学部，广州５１０００６；３．广东省妇幼保健院检验科，广州５１００１０；４．广州金域医学检验中心 有限公司，广州５１０３３０） 摘要：目的　研究连续监测血培养系统（ＣＭＢＣＳｓ）中肺炎链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）的自溶特点和影响因素，建立肺炎 链球菌培养假阴性的检验方法和预防措施。方法　选取肺炎链球菌标准株ＡＴＣＣ６３０３、ＡＴＣＣ４９６１９、卫生部２０１２年４号质控 菌（ＷＳＢ１２０４）和６株临床分离株，在Ｂａｃｔｅｃ９１２０型血培养仪中培养，观察肺炎链球菌在不同时间段的菌体形态差异，比较不 同来源菌株、不同血培养瓶等阳性报警时间及报警后自溶死亡时间的差异。同时，采用肺炎链球菌ＡＴＣＣ６３０３进行实验，比 较快速免疫层析法、乳胶凝集法和１６ＳｒＲＮＡ基因扩增及测序３种方法对于肺炎链球菌的检测能力。结果　模拟实验中肺炎 链球菌在ＣＭＢＣＳｓ中阳性报警后可在８～１０ｈ内自溶死亡，自溶死亡的时间受菌株来源、血培养瓶种类、营养条件等多种因素 的影响。其中Ｂａｃｔｅｃ需氧瓶相对于小儿瓶和厌氧瓶的报警后自溶死亡的时间更短。自溶的肺炎链球菌，直接涂片镜检可能 为革兰阴性球菌或难以辨认的细胞碎片，但可采用乳胶凝集法、胶体金免疫层析法和 １６ＳｒＲＮＡ基因扩增及测序的方法进行 ６ ５ ５ 检测，其最低检测限分别为１０ＣＦＵ／ｍＬ、１０ＣＦＵ／ｍＬ和１０ＣＦＵ／ｍＬ。结论　连续监测血培养系统中肺炎链球菌自溶的影响 因素较多，采用需氧＋厌氧血培养、报警后及时取阳性瓶转种，有利于防止肺炎链球菌假阴性培养的发生，提高血培养的阳性 检出率。 关键词：血培养系统；肺炎链球菌；自溶酶；细菌鉴定 中图分类号：Ｒ４４６．５　　　　文献标志码：Ａ 　　采用连续监测血培养系统（ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｌｙｍｏｎｉｔｏ ＡＴＣＣ６３０３、ＡＴＣＣ４９６１９、卫生部２０１２年４号质控 ｒｉｎｇｂｌｏｏｄｃｕｌｔｕｒｉｎｇｓｙｓｔｅｍｓ，ＣＭＢＣＳｓ）对血液、胸腔 菌（ＷＳＢ１２０４）以及６株经Ｖｉｔｅｋ２仪器鉴定的临床 积液和脑脊液等标本检测时，已生长的肺炎链球菌 分离株 （ＺＹＹ３７Ｇ８、ＺＹＹ３７Ｉ２、ＺＹＹ３７Ｊ７、ＺＹＹ 可能因为自溶而致漏检。本文拟通过 Ｂａｃｔｅｃ９１２０ ３９Ｆ５、ＺＹＹ３８Ｄ６、Ａ３８７）。相关信息资料详见表２。 血培养仪培养标准菌株和分离菌株，对肺炎链球菌 １．３　ＣＭＢＣＳｓ中肺炎链球菌自溶的影响因素研究 的自溶特点和影响因素进行研究，建立肺炎链球菌 １．３．１　菌液浓度　以肺炎链球菌ＡＴＣＣ６３０３制备 阳性报警后培养假阴性结果的检验方法和预防措 ２ ３ ４ ５ ６ １０、１０、１０、１０与１０ＣＦＵ／ｍＬ浓度的菌悬液，取１ 施，提高肺炎链球菌的血培养阳性率，更好地服务于 ｍＬ作为模拟的临床标本注入需氧树脂瓶并立即在 临床。 Ｂａｃｔｅｃ９１２０型血培养仪中进行培养监测。阳性报 警后将培养液稀释１００００倍，取５０ Ｌ用Ｌ型玻璃 μ １　材料和方法 棒均匀涂布于血平板，温育过夜后进行菌落计数。 １．１　主要仪器与试剂　Ｂａｃｔｅｃ９１２０型血培养仪及 阳性报警后的血培养瓶，