北大医学部复习资料输送系统文献翻译--血管破裂增强肿瘤血管渗透性并提高纳米粒递送能力.docx

血管破裂增强肿瘤血管渗透性并提高纳米粒递送能力 实体瘤里的纳米粒分布研究已经揭示大型粒子会被限制渗透，聚集在血管周附近。为了找到一个这种分布模式的解释，我们构想了大小分别为30nm和70nm的两种荧光标记的聚合物纳米粒的转运，在间隔10min的条件下，在缺血的人胰腺BxPC-GFP细胞和BALB/c nu/nu小鼠中，用活体激光共聚焦显微镜评估转运过程。这些聚合物纳米粒构建的非常好，也在别的文献里被描述过。这里，我们将“动态开口”定义为在血管壁上一种有时间限制的开口，将“喷发”定义为从开口中有活力的溢出。十小时时间段内的随机喷发意味着注射体积和激发光和这个事件并没有关系。一般情况下，可观测到的喷发增长速度开始的很早，后边紧接着一个慢速的分散过程。随机的暂时的分布作为证据说明了这不是实验方案所导致的人共产生的，更可能是在实验开始时群簇喷发的，也不是纳米粒或者激光的副产物，，因为按照实验进程和细胞损害的发生，会增加喷发的频率。 所有的治疗组显示了喷发的存在，但是30nm纳米粒较70nm的喷发流时间较短。70nm喷发流的大小明显大于30nm，当70nm纳米粒被控制时，喷发区域从571um2右移至213um2，喷发的持续时间严重右移至148min。30nm喷发流平均占316um2和22min。推测血管的动态不受纳米粒大小的影响，喷发流大小和周期的差异由于更小的纳米粒扩散更快导致的。当纳米粒充分分散，萤光密度下降至检测限以下。在实验过程当中，背景荧光逐渐上升，定性的来说,当30 nm纳米颗粒被用于纳米70nm的地方, 似乎增加更快，有时使爆发难以检测。这又一次意味着更小的纳米粒更容易穿过肿瘤。 但是，在最初的相中，爆发同时包含了不同大小的纳米粒同时进行，对比喷发流增长的速率显示更小的纳米粒转移更快，在喷发开始的时候(p=0.006).这意味着在早起的相中，大型纳米粒转运收到更多的来自组织结构的阻力，一旦完全发展好，喷发流分被扩散主导，则更多的限制。因此血管爆发在最初的喷发流显示之后，可以深入的渗透。 测量了70nm纳米粒到GFP标记的肿瘤细胞的喷发距离，大多数血管被定位在肿瘤附近，带有限制的肿瘤血管灌注肿瘤主体块儿。一个卡方检验被用来对比爆发位置和血管，相对于肿瘤细胞。结果显示一个显著的趋势是，在肿瘤团块附近，相较于较远处的血管，爆发更多。 进一步的实验被用来证明爆发不受限于BxPC3肿瘤细胞系，对于异位肿瘤，对于背窗式模型或者对于在试验中用到的纳米粒示踪剂。我们在U87MG神经胶质瘤细胞中、皮下和正常的BxPC3模型也可能观测到爆发，之前的研究对比了正常的和异位的人类胰腺癌PANC-1细胞，展示了在生长速率、侵入性和转移活性以及VEGF蛋白水平，但是没有显著的形态差异和血管侵入性。我们的结果，与之前的报告一起，提供了一个归纳的证据是这些爆发在小动物肿瘤模型中是很普遍的我们也观测到了爆发，说明爆发不是由共聚焦激光导致的，我们使用阿霉素，这是非常稳定和无效的胰腺肿瘤,作为示踪粒子测试是否喷发血管退化的结果由阿霉素的存在引起的，爆发又容易观察到,但有趣的是溢出的大(85nm)Doxil粒子似乎更受限制的火山喷发。爆发在临床肿瘤的存在,类似于增强渗透性和滞留效应的效果,仍然是未经测试的观察,由于大的困难在临床而不是实验室。我们使用流体动力学模拟与示踪粒子送入模拟流场模仿这些喷发来测试肿瘤间质流体压力之间的关系,通气孔隙度大小和组织在决定喷发特征。其他因素,如粒子硬度和形状也可能影响粒子外渗的性质,在未来我们希望研究它。 喷发大小似乎在大小有最强的影响和密度喷发,虽然物理结构抑制扩散的缺乏可能导致巨大的扩散对仿真结果的影响。喷发至少一样大的图1,补充MOVIES2 - 4和补充图5在大多数条件下模拟测试,尽管实现粒子密度需要随时观察所需喷口与相对较大的大小或更高的压力梯度,特别是对于致密组织抵制大量流体流动。我们的模拟表明,喷发可能发生在不同的条件下对流体压力梯度和喷发大小。虽然爆发背后的具体情况尚不清楚,喷发的数据似乎支持这样的图1中可能发生在正常的生理条件肿瘤的范围。它还预测,更致密的肿瘤会更少的喷发活动由于其更大的能力抵抗流体和颗粒渗透到附近组织,尽管肿瘤的异质特性可能允许密度较低区域的观测。最初的喷发速度也发现依赖转运能力压力梯度和血管间隙尺寸,虽然对压力梯度的依赖并不大U87MG肿瘤等致密的肿瘤组织用于模拟。扩散动力学模拟流场的模拟粒子分散30分钟,之后通风口关闭或被允许和由此产生的粒子分散跟踪保持开放。只要发泄仍然开放,喷发流线性增长,与粒子密度相对稳定。关闭后,喷发流扩张继续适当的粒子扩散系数,但密度下降进入新粒子被切断了,这提供了一个良好的行为的解释30 nm喷发,扩张停止之后迅速消失了。 这个模型提供了爆发的一系列不能在共焦显