鸡新城疫病毒免疫金标试纸条的研制及其应用-预防兽医学专业论文.docxVIP

河北农业大学倾卜论文摘 河北农业大学倾卜论文 摘 要 本实验采川柠檬酸三钠还原氯金酸，制各胶体金颗粒。根据不同粒径的胶体金 颗粒在检测时所璺现的颜色鲜艳(容易分辨)程度，选择20nm的胶体金颗粒作为标 记物。新城疫病毒用低温超速离心法进行提纯，然后免疫动物：对制备的血清采用 辛酸一硫酸铵盐析法进行纯化：抗体经常规PAGE和琼脂扩散试验，结果显示辛酸一 硫酸铵法纯化的抗体，纯度和活性均较高。胶体金标记最低稳定量和最适的pH的试 验结果为30 u g／ml及pH为9．0：对标记后的抗体用低温超速离心法进行纯化。经 过试验胶体金标记抗体最适稀释倍数为1：2，兔抗新城疫抗体平¨羊抗兔抗体的合适 点样艇分别为500 u g／ml和300 u g／mI。制作的试纸条能够在5min左厶显示清晰的 条带。同时加入的稳定剂，能够使抗体保持较长时间的活性和使金标抗体释放较为 完全，在4C干燥器中保存8个月后效果仍然很好。用本试纸条平¨ELISA对15 7个 样品进行检测。结果显示：新城疫胶体金免疫层析法是一种快速、灵敏度高、特异 性强的检测NDV的方法．可以用r流行病学调查，及SPF鸡场的净化。 本试纸条的研制为进一步研究和开发一系列畜禽疾病快速诊断金免疫层析试纸 条奠定了实验基础。 关键词：胶体金：免疫层析；新城疫病毒：快速诊断试纸条 第1页主要缩略词表 第1页 主要缩略词表 英文简写 英文