双氧水的实验报告.docxVIP

双氧水的实验报告 　　实验二：植物组织过氧化氢含量的测定　　一、实验目的　　1.掌握植物组织中过氧化氢含量的定量测定原理　　2.了解H2O2对植物大分子物质的损害机理　　二、实验原理　　植物组织内积累的H2O2是由一些氧化酶　　催化超阳阴离子发生氧化反应而形成。H2O2相对超阳阴离子性质较稳定，但　　还是一种催化剂，它的存在可以直接或间接地导致细胞膜脂过氧化损害，加　　速细胞衰老和解体。同时也有积极地一面，如参与植物抗病性和抗逆性的启　　动和诱导性过程。因此，了解植物组织中H2O2的代谢具有重要意义。　　H2O2与硫酸钛反应生成过氧化物——钛复合物黄色沉淀，　　溶解于硫酸后，在波长410nm出有最大吸收峰，可以进行比色测定。在一定　　范围内，其颜色深浅与H2O2浓度成线性关系　　TiSO4+NH3+H2O2→O2-　　TiSO4(TiO2）+H2O2→[TiO(H2O2)2]2↓+H2SO4　　三、实验材料、设备和试剂　　1.实验材料：雀麦叶片　　2.实验设备：研钵、离心管、离心机、试管、容量瓶、分光光度计等等　　3.实验试剂：①4°条件下处理的丙酮②5umol/mlH2O2③浓氨水④5%TiSO4⑤2mol/LH2SO4　　四、操作步骤　　1.制作标准曲线取7支试管，编号1-7，在通风橱中向各试管加入表1所列试剂，混匀，充分反应后会有沉淀形成，5000r/min,离心5min。留沉淀，弃上清液，并向各试管沉淀中加入2mol/LH2SO45ml，摇动，使沉淀完全溶解。以1号试管对照调零，　　波长410nm处比色测定溶液的吸光度。以吸光度值为纵坐标，过氧化氢物质的量为横坐标，制作标准曲线。　　表1H2O2浓度标准曲线试剂加入量　　称取样品3g，加入3ml预冷的丙酮，在通风橱中冰浴条件下研磨成匀浆后，静置片刻，加丙酮定容至5ml，5000r/min,离心5min。留上清液，并取上清液1ml，加入5%TiSO4，浓氨水，出现沉淀后加入2mol/LH2SO45ml使之充分溶解，然后进行比色测定。五、结果处理　　根据溶液吸光度，在标准曲线上查出相应的过氧化氢的物质的量，表示单位为鲜重，计算公式：　　过氧化氢含量=n?vvs?m　　其中n为标准曲线查得的溶液过氧化氢物质的量，v为样品提取液总体积，vs为吸取样品液总体积，m为样品鲜重　　由标准曲线查得的数据和实验所用数据分别为：　　冰冻的雀麦叶片A1=，n=，v=5ml，vs=1ml，m=3g　　则：过氧化氢含量=?5=1?3　　未经冰冻的雀麦叶片A2=，n=，v=5ml，vs=1ml，m=3g则：过氧化氢含量=?5=1?3　　结果表明：在寒冷条件胁迫下，雀麦叶片中过氧化氢的含量增加。说明由于体内活性氧代谢加强而使过氧化氢发生积累，过氧化氢参与了植物抗逆性过程。　　六、注意事项　　1.丙酮在使用前必须要经过预冷处理，并且在4°的条件下使用。因为，　　在冰浴条件下丙酮保持4°可以减少丙酮挥发，减少其对人体的毒害，而且可以降低过氧化氢的分解过程。　　2.在先后加入5%TiSO4和浓氨水时，要进行摇动，摇动次数和时间应该保　　持一致，以减少实验误差。　　3.根据比色皿的体积，加入硫酸的量要不小于5ml。　　标准曲线测定结果　　图一　　河北工业大学实验报告　　课程：分析化学实验　　班级：姓名：组别：同组人：日期：XX-3-2　　实验：过氧化氢含量测定　　一、实验目的：　　1、掌握应用高锰酸钾法测定过氧化氢含量的原理和方法。2、掌握高锰酸钾标准溶液的配制和标定方法。二、实验原理：　　1、工业品过氧化氢的含量可用高锰酸钾法测定。在稀硫酸溶液中，室温条件下，H2O2被KMnO4定量氧化，其反应式为：　　－＋＋　　5H2O2＋2MnO4＋6H=2Mn2＋5O2↑+8H2O　　根据高锰酸钾溶液的浓度和滴定所耗用的体积，可以算得溶液中过氧化氢的含量。市售的H2O2约为30%的水溶液，极不稳定，滴定前需先用水稀释到一定浓度，以减少取样误差。在要求较高的测定中，由于商品双氧水中常加入少量乙酰苯胺等有机物质作稳定剂，此类有机物也消耗4而造成误差，此时，可改用碘量法测定。　　2、高锰酸钾是最常用的氧化剂之一。市售的高锰酸钾常含有少量杂质，如硫酸盐、氯化物及硝酸盐等，因此不能用精确称量的高锰酸钾来直接配置准确浓度的溶液。用KMnO4配制的溶液要在暗处放置数天，待KMnO4把还原性杂质充分氧化后，再除去生成的MnO2　　＋　　沉淀，标定其准确浓度。光线和Mn2、MnO2等都能促进KMnO4分解，故配好的KMnO4应除尽杂质，并保存于暗处。　　KMnO4标准溶液常用还原剂Na2C2O4作基准物来标定。Na2C2O4