免疫组化抗原修复缓冲液介绍书.pdfVIP

P04596CN_02 免疫组化抗原修复缓冲液说明书 【产品名称】 通用名称：免疫组化抗原修复缓冲液 英文名称：EnVisionTM FLEX Target Retrieval Solution, High pH(50×) 【包装规格】 3×30 mL 【预期用途】 用于免疫组织化学染色前的抗原修复。 【主要组成成分】 Tris /EDTA 缓冲液, pH 9。 【储存条件及有效期】 2～8℃保存。有效期12 个月。 【适用仪器】 组织染色机 （Autostainer Link 48 ） 【样本要求】 1、样本可为经甲醛固定、石蜡包埋的组织切片。 2 、根据固定剂、组织类型与组织厚度确定固定时间。例如，当组织切片厚 3 至 4 毫米 时，应采用中性甲醛固定18 至24 小时。 3、石蜡包埋切片的最佳厚度约为4 微米。 4 、样本应置于载玻片上包埋，如FLEX IHC 载玻片（代码K8020 ）。将组织切片置于载 玻片上，尽可能平整、无褶皱，然后在包埋。褶皱过多会影响染色结果。 注：  所选载玻片的宽度必须与组织染色机相适合。若需了解那些载玻片可用，请参见其 Dako 设备的操作者手册。  石蜡切片需在预先加热的、内含蒸馏水或去离子水的水槽内包埋。水槽内不添加然 和添加剂（如凝胶、聚左旋赖氨酸等）。在低于 60℃条件下，通过加热烘干切片， 加热时长不超过60 分钟。为了确保切片与载玻片之间具有粘附性，在干燥之前，排 除切片下的水是非常重要的。 【检测方法】 1) 试剂配制： 1．按照设计的染色步骤，用蒸馏水或去离子水稀释配制足够的免疫组化抗原修复缓冲液。 2 ．若预先需采用Dako PT Link 处理，则可将管形瓶清空，将免疫组化抗原修复缓冲液倒入 Dako PT Link 槽内，添加蒸馏水或去离子水至标记线（填充线）。 2 ）预处理操作过程： 为了获得最佳染色结果，可使用不同原理的组织染色机。在开始操作组织染色机之前， 请仔细阅读Dako 设备的操作者手册。 为了确定抗原决定簇修复的重复性，建议将载玻片置于玻片架上。这可以确保每轮中， 切片均加热均匀。 建议在3 合1 样本制备过程中使用PT Link 。 按照3 合1 操作规程，可对经甲醛固定、石蜡包埋组织切片进行脱蜡、再水合与热引 P04596CN_02/K800421-2CN 1/4 P04596CN_02 导的抗原决定簇修复（HIER ）操作：、 1. 通过利用蒸馏水或去离子水，以1：50 的倍比稀释浓缩型免疫组化抗原修 复缓冲液，制备工作液。 2. 往PT Link 槽内添加足够（1.5L）的工作液，直到组织切片完全覆盖。 3. 将PT Link 内的溶液预热至65℃。 4. 将已架好的、经甲醛固定、石蜡包埋的组织切片置于PT Link 槽内事先预 热好的免疫组化抗原修复缓冲液（工作液）中，97℃下孵育20 至40 分钟。 最佳孵育时间，由使用者自行确定。 5. 将切片转至65℃的PT Link 中冷却。 6. 将组织染色机切片架与载玻片从PT Link 槽中取出，然后迅速的将切片置 于内含经稀释的、室温下的清洗液的缸/槽（如：PTLink 清洗装置，代码 PT109 ）中。 7. 将切片置于经稀释的、室温下的清洗液中1 至5 分钟。 8. 将切片置于组织染色机上，开始染色。在染色过程中或在免疫组化染色过 程中，不能对切片进行脱水处理。 9. 染色后，建议进行脱水、清洗与永久封固处理。 注：当在3 合 1 样品制备过程中使用时，若在室温条件下储存，则在 5 天内，经稀