硫辛酸对氢醌所致V79细胞线粒体膜电位损伤的保护性实验分析.pdfVIP

·中文论著摘要· 硫辛酸对氢醌所致V79细胞线粒体膜电位损伤的 保护性实验研究 刖 吾 近年来，随着人们生活水平的提高，室内装修与装饰已很普遍，使室内污染 成为人们关注的问题。儿童少年正处于快速生长发育期，与成人比较，室内污染 对儿童少年健康的危害更加严重。儿童患呼吸系统疾病尤其是哮喘的发病率逐年 升高，究其原因可能与环境污染程度加重，室内外空气中含有的粉尘，二氧化碳， 甲醛，苯，氨以及香烟的烟雾等有关。然而，这些污染物造成的肺损伤机制尚不 十分清楚。本研究以广泛存在于油漆及装饰材料中苯的主要代谢产物氢醌 预方法。 HQ是苯在体内的重要代谢产物，在自然界中广泛存在，同时也是香烟烟雾和 焦油中的主要成分之一。HQ在体内代谢过程中可产生大量自由基导致支气管和肺 的损伤，但目前确切机制尚不十分清楚。已知线粒体在外来化学物所致的细胞损 伤，尤其是氧化损伤中为主要的靶细胞器，线粒体损伤是导致多种疾病发生的主 要病理机制之一。硫辛酸僻．Q．LipoicAcid，LA)是目前备受关注的抗氧化剂，已经 广泛用于糖尿病并发症的预防和治疗中。本文采用噻唑蓝(MTT)和线粒体特异性 iodide，JC．1)的方法， 检测氢醌对体外培养的中国仓鼠肺细胞(V79)的毒性作用，并重点研究HQ对线粒 membrane 体膜电位(Mitochondrial potential，／X甲m)的影响，同时选择硫辛酸 Acid，LA)作为抗氧化剂，进行干预性研究，为进一步研究HQ的病理发 僻．Q．Lipoic 生机制，采取有效的预防与治疗措施提供理论依据。 研究目的 1、探讨不同剂量HQ对V79细胞的毒性作用。 2、探讨能引起V79细胞毒性作用的HQ剂量对V79细胞线粒体膜电位的影 响。 3、采用LA进行干预性研究，确定LA的适宜干预剂量及可能保护机制。 实验材料和方法 一、实验材料 -EDTA，JC．1，MTT。 二、实验方法 1、细胞的培养与分组 100肛g／ml链霉素)置37C，5％C02培养箱中，每2天换液1次。 将处于对数生长期的V79细胞按105个／ml的细胞密度接种到96孔板、6孔 板和培养瓶中，培养24h后换成含1％胎牛血清的培养液，并分组施加以下处理因 组，HQ终浓度为100panol／L。继续培养24h。 2、细胞存活率的测定 MTT法 3、线粒体膜电位的测定 流式细胞术和倒置荧光显微镜 2 4、统计分析 采用SPSSll．5统计软件中单因素方差分析处理，数据用z姆表示，检验标注 a=0．05。 实验结果 一、不同浓度HQ对V79细胞存活率的影响 细胞存活率下降，呈剂量．效应关系。 二、LA对HQ所致779细胞存活率下降的干预作用 度下的LA可以明显拮抗50和100I_tmol／L HQ所引起的V79细胞存活率的下降， 差异有统计学意义伊O．05)。 三、LA对HQ所致779细胞线粒体膜电位影响的千预作用 膜电位分别上升至O．79和0．63。 耋口结论F匕 1、对线粒体的损伤可能是HQ引起V79细胞毒性的重要途径之一。 2、一定浓度的LA对HQ引起的V79细胞毒性和线粒体损伤有保护作用。 关键词 氢醌；硫辛酸；线粒体膜电位；流式细胞术 3 ● 英文论著摘要 ● on Acid Studyprotectionof俾)一Q—Lipoic