高产橙花叔醇的酵母细胞工厂创建-中国中药杂志.PDF

２０１７年８月 第４２卷第１５期 Ｖｏｌ４２，Ｎｏ１５ Ａｕｇｕｓｔ，２０１７ 高产橙花叔醇的酵母细胞工厂创建 １，２，３ １，２，３ ２，３ １ ４ ２，３ ２，３ 张丽丽 ，马晓琳 ，王冬 ，郁彭 ，黄璐琦 ，张学礼 ，戴住波 （１天津科技大学生物工程学院，天津３００４５７； ２中国科学院天津工业生物技术研究所，天津３００３０８； ３中国科学院系统微生物工程重点实验室，天津３００３０８； ４中国中医科学院 中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地，北京 １００７００） ［摘要］　橙花叔醇为萜类精油成分，具有抗菌、抗肿瘤和抗氧化等多种生物学活性。为了实现在酿酒酵母中异源生产橙花叔 醇，该研究首先将猕猴桃Ａｃｔｉｎｉｄｉａｃｈｉｎｅｎｓｉｓ来源的橙花叔醇合酶（ＮＥＳ）基因通过密码子优化、人工合成后转入底盘菌株ＦＰＰ －１ ００１中获得工程菌株ＮＥＳ００１，其橙花叔醇产量达到２７１ｍｇ·Ｌ 。在进一步工作中，橙花叔醇合酶的Ｎ端通过连接肽ＧＧＧＳ 融合法尼烯合酶（ＦＰＳ）后得到橙花叔醇产量显著提高的工程菌ＮＥＳ００２，其产量是 ＮＥＳ００１的５９８０倍，达到 １６２０７ｍｇ· －１ Ｌ 。最终，通过恢复ＮＥＳ００２中色氨酸生物合成缺陷基因ＴＲＰ１得到工程菌ＮＥＳ００３，该菌在高密度发酵体系中橙花叔醇产 －１ 量能达到１７１１５３ｍｇ·Ｌ 。该研究为微生物发酵法生产橙花叔醇等倍半萜化合物提供了基础。 ［关键词］　精油；橙花叔醇；合成生物学；酿酒酵母 Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｆａｃｔｏｒｉｅｓｆｏｒｈｉｇｈｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｎｅｒｏｌｉｄｏｌ ｉｎＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ １，２，３ １，２，３ ２，３ １ ＺＨＡＮＧＬｉｌｉ ，ＭＡＸｉａｏｌｉｎ ，ＷＡＮＧＤｏｎｇ ，ＹＵＰｅｎｇ， ４ ２，３ ２，３ ＨＵＡＮＧＬｕｑｉ，ＺＨＡＮＧＸｕｅｌｉ ，ＤＡＩＺｈｕｂｏ （１ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＴｉａｎｊｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｔｉａｎｊｉｎ３００４５７，Ｃｈｉｎａ； ２．ＴｉａｎｊｉｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｔｉａｎｊｉｎ３００３０８，Ｃｈｉｎａ； ３．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＳｙｓｔｅｍｓＭｉｃｒｏｂｉａｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｔｉａｎｊｉｎ３００３０８，Ｃｈｉｎａ； ４ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙＢｒｅｅｄｉｎｇＢａｓｅｏｆＤａｏｄｉＨｅｒｂｓ，ＮａｔｉｏｎａｌＲｅｓｏｕｒｃｅＣｅｎｔｅｒｆｏｒＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ， ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｎｅｒｏｌｉｄｏｌｉｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｏｆｔｅｒｐｅｎｏｉｄｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌａｎｄｈａｓｅｘｃｅｌｌｅｎｔａ