负性协同刺激分子B7.docVIP

2009年12月在《中国肿瘤治疗杂志》第16卷第6期发表 负性协同刺激分子B7-H4在NSCLC中的表达及其临床意义 张彩娣1史建平1王凤鸣2徐秋岚3（1. 南通大学 附属第三医院 呼吸科，江苏 无锡 214041；2. 苏州大学 医学生物技术研究所，江苏 苏州 215007；3. 南通大学 附属第三医院 病理科 江苏 无锡 214041）【摘要】目的：探讨负性协同刺激分子B7-H4在肺癌NSCLC）中的表达及其与肺癌临床病理CD3+T细胞浸润程度的相关性。方法：2008年1月-2009年4月的外科手术切除NSCLC52例采用免疫组织化学法检测NSCLC组织中B7-H4分子的表达CD3+T细胞浸润程度并分析B7-H4表达水平与临床病理的相关性。结果：52例NSCLC组织中B7-H4阳性表达25例，阳性率为48.08%（25/52），正常肺组织不表达或较少表达B7-H4，差异具有统计学意义（P0.05）；其表达水平与NSCLC临床分期呈正相关（0.05）；与淋巴结转移呈正相关（0.05）；与其他临床病理参数无关（0.05）；与CD3+T淋巴细胞浸润程度呈负相（P0.05）。结论：负性协同刺激分子B7-H4在NSCLC发病过程中可能起重要的作用，其阳性表达与临床分期及淋巴结转移密切相关，B7-H4NSCLC的诊断及治疗提供了新的方向。 ［关键词］B7H4；CD3+T细胞；NSCLC ［中图分类号］ ［文献标志码］ ［文章编号］作者简介］张彩娣72-），女，汉族，江苏省无锡市人，在读硕士研究生，主要从事肿瘤免疫学方面的研究 确诊时已属晚期研究显示[]，肿瘤的形成与肿瘤患者免疫逃逸有关，肿瘤细胞可通过对自身表面抗原的修饰及改变肿瘤组织周围的微环境来逃避机体的免疫识别与攻击。[2]，肿瘤细胞高表达B7-H4分子，B7-H4是B7家族中最新发现的一个新成员[]。可以通过阻止T细胞增殖，抑制细胞因子分泌，和细胞周期，负性调节T细胞介导的免疫反应[3.4]。目前已有报道[5]B7-H4在直肠癌中高表达，B7-H4可抑制肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）的浸润，国外也有报道在卵巢癌[6.7]中及在在子宫内膜腺癌[8]中B7-H4高表达。另外李文桦实验证实[9]：如果将不表达或低表达B7-H4mRNA的肿瘤细胞株接种小鼠，形成的肿瘤组织不仅高表达其mRNA，而且高表达B7-H4蛋白分子。以上结果提示我们肿瘤细胞表面表达的B7H4可能参与肿瘤的形成，在肿瘤细胞逃逸免疫系统的攻击中可能发挥一定的作用。Sun[10]等首次研究了B7-H3、B7-H4在原发性小细胞肺癌中的表达。该研究中得出B7-H4在肺癌组织中高表达，而在正常肺组织中不表达或低表达[]，B7-H4高表达与淋巴结转移相关，与TIL负相关。我们采用免疫组织化学方法，检测肺癌组织中B7-H4的表达及CD3+T淋巴细胞浸润程度，分析肿瘤组织中的B7-H4表达水平与患者临床病理参数的相关性及其对CD3+T淋巴细胞浸润的影响B7-H4的表达在肺癌发生和发展中的作用，从而为肺癌生物治疗阻断B7-H4与其受体的相互作用，将有望成为干预的潜在靶分子。1 材料与方法 1.1　2008年1月-2009年4月的外科手术切除NSCLC 52例术前均未行放、化疗男性30例，女性22例平均年龄62岁（38-74岁）I期7例，Ⅱ期22例，Ⅲ期20例（Ⅲa期15例，Ⅲb期5例） Ⅲ期3例；有淋巴结转移者共33例其中吸烟者31例；；中央型肺癌18例，周围型肺癌34例；鳞癌20例，腺癌23例，肺泡细胞癌5例, 大细胞癌4例；有淋巴结转移者共33例。所有患者术前均未行放、化疗；诊断均经病理检查证实。8例肺组织标本作对照。1.2　试剂 鼠抗人B7-H4抗体购自北京博奥森生物技术有限公司。抗CD3单抗购自福州迈新生物科技有限公司；辣根过氧化物酶标记二抗购自福州迈新生物科技有限公司免疫组化PV购自北京中杉金桥生物技术有限公司B7-H4、CD3的表达 采用免疫组化PV6000二步法，按试剂盒说明书进行操作，用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。B7-H4染色以细胞浆及细胞膜出现棕黄色颗粒状物为B7-H4阳性染色。染色结果判断标准根据阳性细胞百分比，采用半定量分级法判定染色结果：阳性细胞数所占百分比10%为阴性；阳性细胞数所占百分比10%为阳性（ 10%40%记为+，40%80%为++，80%记为+++）。 CD3+T细胞浸润程度的评估：根据CD3+T细胞在肿瘤中心部位及间质部位的分布情况，划分为四个等级：0，无浸润；1，局部少量浸润；2，适度浸润；3，大量浸润。其中0和1归为低度浸润组，2和3归为高度浸润组[]。 1.4 统计方法。0.05有统计学意义。 2 结果 2.1 B7-H4在肺