冻融冻干法制备的流感疫苗脂质体的细胞免疫研究.pdf

学 报 ７３０ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１５，４６（６）：７３０－７３３ 冻融冻干法制备的流感疫苗脂质体的细胞免疫研究 １ １ ２ １ ２ １ 徐菀佚 ，乔建斌 ，马　波 ，王　然 ，钱　雯 ，鲁卫东 １ ２ （昆明医科大学药学院云南省天然药物药理重点实验室，昆明６５０５００；云南沃森生物技术股份有限公司，昆明６５０１０６） 摘　要　分别用冻融冻干法、薄膜分散冻干法制备流感疫苗脂质体干粉，通过小鼠肺部免疫后，从细胞免疫水平考察 两种方法制备脂质体的免疫原性。将小鼠分为非脂质体疫苗原液组（ｎｏｎｌｉｐｏｓｏｍｅ）、薄膜分散冻干法制备流感脂质体疫苗 组、冻融冻干法制备流感疫苗脂质体组、阳性对照和阴性对照组（ｎ＝５）。脂质体疫苗冻干粉组以每只血凝素含量（以 Ｈ１Ｎ１计）６ ｇ肺部免疫，以非脂质体疫苗原液每只血凝素含量６ ｇ腹腔给药作为阳性对照，以未免疫小鼠（ＰＢＳ给药）为 μ μ ＋ ＋ 阴性对照。免疫２８ｄ，ＭＴＴ法检测脾淋巴细胞的增殖，流式细胞术检测ＣＤ４与ＣＤ８细胞。结果显示：两种方法制备的流 感疫苗脂质体冻干粉均可诱导细胞免疫，且免疫效果相当，说明冻融冻干法有望进一步应用于减毒活疫苗制备。 关键词　流感疫苗脂质体；冻融冻干法；细胞免疫 中图分类号　Ｒ３９２　　文献标志码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１５）０６－０７３０－０４ ｄｏｉ：１０．１１６６５／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－５０４８ Ｃｅｌｌｕｌａｒｉｍｍｕｎｉｔｙｏｆｉｎｆｌｕｅｎｚａｖａｃｃｉｎｅｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄｌｉｐｏｓｏｍｅｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙ ｆｒｅｅｚｅｔｈａｗｉｎｇ １ １ ２ １ ２ １ ＸＵＷａｎｙｉ牞ＱＩＡＯＪｉａｎｂｉｎ牞ＭＡＢｏ牞ＷＡＮＧＲａｎ牞ＱＩＡＮＷｅｎ 牞ＬＵＷｅｉｄｏｎｇ １ＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙｆｏｒＮａｔｕｒａｌＰｒｏｄｕｃｔｓ＆ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ牞ＫｕｎｍｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｋｕｎ ２ ｍｉｎｇ６５０５００牷ＷａｌｖａｘＢｉｏｔｅｃｈＣｏ牞Ｌｔｄ牞Ｋｕｎｍｉｎｇ６５０１０６牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｃｅｌｌｕｌａｒｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙｏｆｉｎｆｌｕｅｎｚａｖａｃｃｉｎｅｌｉｐｏｓｏｍｅｓｄｒｙｐｏｗｄｅｒｕｓｉｎｇｔｈｅｆｉｌｍ ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎａｎｄｆｒｅｅｚｅｔｈａｗｉｎｇＭｉｃｅｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｈｅｎｏｎｌｉｐｏｓｏｍａｌｉｎｆｌｕｅｎｚａｖａｃｃｉｎｅｇｒｏｕｐ牞ｆｉｌｍｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ ｐｒｅｐａｒｅｄｌｉｐｏｓｏｍａｌｉｎｆｌｕｅｎｚａｖａｃｃｉｎｅｇｒｏｕｐ牞ｆｒｅｅｚｅｔｈａｗｉｎｇｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄｉｎｆｌｕｅｎｚａｖａｃｃｉｎｅｌｉｐｏｓｏｍｅｇｒｏｕｐ牞ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ牗ｎ＝５牘６ ｇｏｆｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎｏｆＨ１Ｎ１ｓｕｂｔｙｐｅｐｅｒｍｏｕｓｅｗａｓｄｅｌｉｖ μ ｅｒｅｄｔｒａｃｈｅａｌｌｙｔｏｔｈｅｍｉｃｅｏｆｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄｌｉｐｏｓｏｍｅｓｇｒｏｕｐｓ牞ｗｉｔｈｔｈｅｓａｍｅｄｏｓｅｆｏｒｎｏｎｌｉｐｏｓｏｍｅｓｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｙ ｄｅｌｉｖｅｒｅｄｇｒｏｕｐｓａｓｔｈ