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核酸的结构生物学研究 1．核酸 核酸不仅是基本的遗传物质，而且在蛋白质的生物合成上也占重要位置，因而在生长、遗传、变异等一系列重大生命现象中起决定性的作用。核酸在实践应用方面有极重要的作用，现已发现近2000种遗传性疾病都和DNA结构有关。如人类镰刀形红血细胞贫血症是由于患者的血红蛋白分子中一个 HYPERLINK /view/15155.htm \t _blank 氨基酸的遗传密码发生了改变，白化病患者则是 HYPERLINK /view/1468288.htm \t _blank DNA分子上缺乏产生促黑色素生成的酪氨酸酶的 HYPERLINK /view/8563.htm \t _blank 基因所致。 HYPERLINK /view/10179.htm \t _blank 肿瘤的发生、 HYPERLINK /view/2584.htm \t _blank 病毒的感染、 HYPERLINK /view/290246.htm \t _blank 射线对机体的作用等都与核酸有关。70年代以来兴起的 HYPERLINK /view/79554.htm \t _blank 遗传工程，使人们可用人工方法改组DNA，从而有可能创造出新型的 HYPERLINK /view/4579.htm \t _blank 生物品种。如应用遗传工程方法已能使大肠杆菌产生 HYPERLINK /view/1340.htm \t _blank 胰岛素、干扰素等珍贵的 HYPERLINK /view/51522.htm \t _blank 生化药物。 1.1．核酸的基本单位——核苷酸 核苷酸是一类由嘌呤碱或嘧啶碱基、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。戊糖与有机碱合成核苷，核苷与磷酸合成核苷酸，4种核苷酸组成核酸。核苷酸主要参与构成核酸，许多单核苷酸也具有多种重要的生物学功能，如与能量代谢有关的三磷酸腺苷（ATP）、脱氢辅酶等。核苷酸的示意图如右图所示： 1.2．核酸的分类和分布 脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid,DNA）：遗传信息的贮存和携带者，生物的主要遗传物质。在真核细胞中，DNA主要集中在细胞核内，线粒体和叶绿体中均有各自的DNA。原核细胞没有明显的细胞核结构，DNA存在于称为类核的结构区。每个原核细胞只有一个染色体，每个染色体含一个双链环状DNA。 核糖核酸（ribonucleic acid,RNA）：主要参与遗传信息的传递和表达过程，细胞内的RNA主要存在于细胞质中，少量存在于细胞核中，病毒中RNA本身就是遗传信息的储存者。另外，在植物中还发现了一类比病毒还小得多的侵染性致病因子称为类病毒，它是不含蛋白质的游离的RNA分子，还发现有些RNA具生物催化作用（ribozyme）。 1.3．核酸的研究历史和重要性 1869年，Miescher从脓细胞的细胞核中分离出了一种含磷酸的有机物，当时称为核素（nuclein）后称为核酸（nucleic acid）。 1944年，Avery等通过肺炎球菌转化试验证明DNA是遗传物质。 1953年，Watson和Crick提出DNA结构的双螺旋模型。 1958年，Crick提出遗传信息传递的中心法则。 70年代，建立了DNA重组技术。 80年代以后，分子生物学、分子遗传学等学科突飞猛进发展，实施人类基因组计划（HGP）。 1.4．核酸的变性、复性和杂交 变性：在物理、化学因素影响下，DNA碱基对间的氢键断裂，双螺旋解开，这是一个是跃变过程，伴有A260增加（增色效应），DNA的功能丧失。 复性：在一定条件下，变性DNA单链间碱基重新配对恢复双螺旋结构，伴有A260减小（减色效应），DNA的功能恢复。 2．DNA的结构 2.1．DNA的一级结构 DNA的一级结构：DNA分子中各脱氧核苷酸之间的链接方式（3`-5`磷酸二酯键）和排列顺序，称为DNA的一级结构，简称为碱基序列。一级结构的走向规定为5`-3`。不同的DNA分子具有不同的核苷酸排列顺序，因此携带有不同的遗传信息。 2.2．DNA的二级结构 DNA的二级结构： DNA双螺旋模型特点：两条反向平行的多聚核苷酸链沿一个假设的中心轴右旋相互盘绕而形成；磷酸和脱氧核糖单位作为不变的骨架组成位于外侧，作为可变成分的碱基位于内侧，链间碱基按A-T,G-C配对（碱基配对原则）；螺旋直径2nm，相邻碱基平面垂直距离0.34nm，螺旋结构每隔10个碱基对（base pair,bp）重复一次，间隔为3.4nm。 影响DNA双螺旋结构稳定的因素： 氢键 碱基堆集力 磷酸基上负电荷被胞内组蛋白或正离子中和 碱基处于疏水环境中 DNA双螺旋结构的意义：该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征，最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA复制、转录和