鲤鱼诱导型一氧化氮合成酶全长HID克隆及其在外周-中国畜牧兽医.PDFVIP

中国畜牧兽医 鲤鱼诱导型一氧化氮合成酶全长克隆 及其在外周血白细胞中的差异表达分析 温振才曹津津卢 强 吉林大学人兽共患病研究所长春 摘 要试验旨在获得鲤鱼诱导型一氧化氮合成酶 全长序列并以此 为基础探讨在丝裂原刺激下外周血白细胞中的表达变化以从鲤鱼正常外周血白细胞 文库中获得的 的 序列为基础采用基因文库筛选和 末端快速扩增技术 相结合的方法成功扩增出 鲤鱼 全长序列然后进行鲤鱼外周血白细胞原代培养分成对照组和试验组其中试验组分别为脂多 糖 刺激 刀豆蛋白 刺激 对照组为相同培养时间无丝裂原刺 激的外周血白细胞根据得到的 全长序列和鲤鱼 序列分别设计特异性引物应用实时荧光定量 方法检测各组外周血白细胞中 在 水平上的表达情况并进行分析序列分析结果显示最后获得 的 片段共 包含 的 端非编码区 的 端非编码区一个 的完整的开放阅读 框 共编码 个氨基酸序列同源性分析结果显示该序列与鲫鱼 基因同源性高达 实时荧 光定量 结果显示经 刺激的试验组外周血白细胞中 表达量均升高且短时间 刺激的表 达量高于长时间 刺激的表达量综上所述在 刺激过程中 在外周血白细 胞中表达量均有上调结果提示存在炎症反应的动态变化 关键词鲤鱼 克隆外周血白细胞差异表达分析 中图分类号 文献标识码 文章编号