显微镜的七观察方法.pptVIP

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4. 缺点 观察效果与标本方向密切相关 操作较复杂 必须有多元件,结构复杂的高数值孔径RC物镜 观察荧光效果不如明场物镜 5. 应用 所有类型的细胞,组织(无论活体,染色,未染色),晶体表面细节,透明聚合物,玻璃和其它类似材料,尤其适用于显微操作 * 奥林巴斯传统胶片相机在显微研究市场上已经取得的良好的业绩。 公司为了配合最新的研究需要又推出了多款适用于各种科学研究用的胶片相机和数码相机。 帮助使用者更方便的利用显微摄影技术,用更简单的操作方法拍出更漂亮的显微图片。 * * * 高度集成化,省去用户选择麻烦,提供多种滤镜组合满足多种研究需求 * 如果用户的选择超出公司供货范围,用户还可以根据自己的实验需求购买所需滤镜组合进行安装 * 油镜需要无荧光镜油 * 光栏越大,受光面积越大,周遍进入物镜的光越多,干扰越强,适度关小光栏,减少杂光干扰 * 奥林巴斯传统胶片相机在显微研究市场上已经取得的良好的业绩。 公司为了配合最新的研究需要又推出了多款适用于各种科学研究用的胶片相机和数码相机。 帮助使用者更方便的利用显微摄影技术,用更简单的操作方法拍出更漂亮的显微图片。 * 奥林巴斯传统胶片相机在显微研究市场上已经取得的良好的业绩。 公司为了配合最新的研究需要又推出了多款适用于各种科学研究用的胶片相机和数码相机。 帮助使用者更方便的利用显微摄影技术,用更简单的操作方法拍出更漂亮的显微图片。 三色滤色镜的特性曲线 激发 分色 吸收 双重染色标本的单色和双色观察 WU WIB DUAL BAND WIBA WIG WIB DAPI+FITC FITC+PI 单色滤色镜的特性曲线 双色滤色镜的特性曲线 现行显微镜特点和各种滤色镜 自由组合 激发块 吸收滤色镜 激发滤色镜 分色镜 油镜应使用荧光油 物镜光栏的运用 光栏全开启 光栏适当关小 减少杂散光干扰 荧光的衰减 防衰减的方法 使用抗衰减剂 选择衰减小的荧光素 降低激发光强度 降低标本中氧的浓度 有衰减的标本 使用抗衰减剂的效果 汞灯灯箱构造 灯室,上下、左右旋钮,聚光镜旋钮 按观察方法分 7-4 4.偏光:有些物质在两个呈一定夹角的偏光滤片之间可现呈鲜明的对比,或根据双折射性能和定向呈现颜色 偏 光 1 原理 依据波动光学原理观察和精密测定标本细节,或透明物体改变光束的物理参数,以此判别物质结构的一种显微镜 自然光(多振动面) 偏振器1 偏振器2 偏振光(单一振动面) 各向同性:单折射体,光性质不因照射方向而改变,普通气体、液体、非结晶固体等 各向异性:双折射体,光速度、折射率、吸收和振动面、振幅随照射方向不同,晶体、纤维等 应用: 矿物质、化学物品鉴别 鉴别纤维、染色体、淀粉粒、细胞中晶体 植物病理检验 鉴别骨骼、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿瘤细胞、横纹肌和毛发等 偏光显微镜主要用于检测矿石,地质大学会用到,特别是可以用来鉴定珠宝,另外可以检测生物内骨骼,这个我还没有遇见实例,还可以检测生物化学结晶,化学院用来观察结晶液像,其他在纺织物品化学成分上检测上,物理芯片上等,凡是观察双折射晶体会使用偏光显微镜 。 按观察方法分 7-5 5.相衬(差):利用光线通过分别处于聚光镜与物镜的一对互补的光环后产生干涉(强度叠加或减弱),即相位差转变成了光强差,从而可清楚观察到使原来不易看清的透明类样品(即相位物体,如活细胞)。 相 差(衬) 相 差(衬) 1 原理 利用被检物体的光程(折射率 x 厚度)差进行镜检,即利用干涉现象,将相位差变为人眼可以分辨的振幅差 共轭面:吸收光线,直射光通过 补偿面:相位推迟,衍射光通过 物镜相板 聚光镜环状光阑 2 特点 鉴定活体细胞最实用、最经济的方法 3 缺点 需要光强高 切片不能太厚(5~10um) 盖片、载片需符合标准 最好配用单色滤光镜 操作较麻烦 荧光效果不如明场物镜 4 应用: 无色透明活体标本的细微结构,检查,鉴定活体细胞(培养细胞,分离细胞) 按观察方法分 7-6 6.DIC:照明光由微分干涉对比棱镜变为两束衍射光,并使样品高度差异造成在光路上的微小差异,而光路差异变为利用微分干涉对比棱镜和检偏振器的明暗对比。有时也利用敏感色板(波长补偿片),加强了高度差异的颜色变化。 DIC 相衬 DIC微分干涉相衬 1 原理 通过特制的棱镜将偏振光分解相互垂直,强度相等的光束,光束载极近的两点(小于显微镜的分辨率)上通过被检物体,从而在相位上略有差别,使图象呈现出立体三维感觉。 2 特点 可以使被检物体产生三维立体感觉 观察效果更直观 无须特殊物镜,与荧光观察配合更好 可以调节背景和物体的颜色变化而达到理想的效果。

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