中国水仙八氢番茄红素脱氢酶基因PDS的克隆及.pdfVIP

分子植物育种，2008年，第6卷，第3期，第574—578页 MolecularPlantBreeding，2008，Vo1．6，No-3，574—578 新基因、新种质、新品种 NewGene＆Germplasm 中国水仙八氢番茄红素脱氢酶基因(PDS)的克隆及表达分析 陈段芬 彭镇华 “高志民1’ l国际竹藤网络中心，国家林业局竹藤科学与技术重点开放实验室，北京，100102；2中国林业科学研究院林业研究所，北京，100091 ·同等贡献作者 ”通讯作者．pengzh@icbr．ae．ca 摘 要 八氢番茄红素脱氢酶(PDS)是影响类胡萝 卜素合成的一个重要限速酶，在植物花色发育过程中起着 重要作用。采用RT．PCR技术从中国水仙(NarcissUStazettavar．chinensis)幼嫩花蕾中分离到一个新的水仙花 色发育相关的PDS基因，命名为NTPDS1(GenBank登记号：EU138883)。该基因长 l719bp，具有一个 l713bp 的完整开放读码框(ORE)，编码 570个氨基酸。序列分析表明，NTPDS1编码的氨基酸序列与其它植物的PDS 蛋 白有很高的相似性 。系统进化树分析显示，Ⅳ D．s与喇叭水仙亲缘关系最近。利用半定量PCR技术进行 组织表达模式分析发现，该基因在中国水仙的花、叶片和根中均有表达，但 以花器官中表达量最高；在花瓣和 副冠中的表达量高于雄蕊和雌蕊 。 关键词 中国水仙，PDS基因，序列分析，半定量PCR C1oningandExpressionAnalysisofPDSGeneinNarcissustazettavar． chinensis ChenDuanfen ’ PengZhenhua ” GaoZhimin ’ 1InternationalCenterforBambooandRattan，SFAKeyLaboratoryofBambooandRattanScienceandTechnology,Beijing,100102；2ResearchnIsti- tuteofForestry,ChineseAcademyofForestry,Beijing，100091 ’Theauthorswhocontributeequally ”Correspondinguahtor，pengzh@icbr．ac．ca Abstract Phytoenedesaturase(PDS)isoneofthekeyenzymesinthecarotenebiosynthesispathwayandplaysna importantroleinhteprocessofflowercolordevelopment．Anewgene，namedasNTPDS1 (GenBankaccession number：EU138883)，wasclonedfromthefirststrandofNarcissustazettavar．chinensiseDNAthroughRT—PCRby usingprimersdesignedaccordingtothePDSgenefamilyconservedregion．Thesequenceconsistsofl719bp，has na openreadingrfma eofl7l3bpencodingapolypeptideof570aminoacids．Homologynaalysisshowedhtatthe deducedNTPDS1proteinwashighlyhomologoustootherPDSproteinsfrom differentspecies．Phylogeneticnaaly- sisaloindicatedhtatNTPDS1wasmorerelatedtoPDSofNarcissuspseudonarcissus．Thesemi—qunatitativePCR resultsrevealedhtathtertanscriptofNTPDS1genewasdetectableinvegetativenadflowers，especiallyhihginflow— ers．W ithinopenflowers。levelswerehighestintheorgansofpetalsandcornaawhilelowerni stamennadp