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奥沙普秦的合成实验报告(共6篇) 　　实验三奥沙普秦的制备　　[实验目的]　　1.了解消炎镇痛药奥沙普秦　　2.学习制备奥沙普秦的反应原理　　3.掌握奥沙普嗪的实验室合成方法　　[实验原理]　　奥沙普秦，化学名为4，5-二苯基噁唑-2-丙酸，是一种长效芳基丙酸类非甾体抗炎药，由美国Wyethol)，中间装上球形冷凝管，两侧用磨口塞子塞住，冷凝管上端加上装有无水氯化钙的干燥管，加热到90～95℃后继续搅拌1h后，加入乙酸铵(，)、冰乙酸，67mmol)，继续在90～95℃搅拌。再加水(10-12mL)，于90～95℃搅拌。反应完毕后，冷却至室温，反应瓶中析出晶体，过滤，收集固体后干燥，得粗品。[注意事项]　　1.反应仪器必须干燥无水　　实验四苯片呐醇及苯片呐酮的制备与红外光谱的测定　　[实验目的]　　1.了解激发态分子化学行为和光化学分子合成的基本原理2.初步掌握光化学合成实验技术　　3.了解光化学异构产物与不同波长的紫外光之间的关系4.掌握制备苯片呐醇和苯片呐酮的方法[实验原理]　　二苯酮的光化学还原是研究得较清楚的光化学反应之一。若将二苯酮溶于一种质子给与体的溶剂中，如异丙醇,并将其暴露于紫外光中时，会形成一种不溶性的二聚体——苯片呐醇。还原过程是一个包含自由基中间体的单电子反应，苯片呐醇与强酸共热或用碘当催化剂，在冰醋酸中反应,发生重排，生成苯片呐酮。　　O　　2　　hv　　HOOH　　+　　O　　HOOH　　3实验原理　　人工抗原的制备原理　　奥沙普秦为小分子物质，本身不具有诱导产生抗体的能力，必须设法先将奥沙普秦与载体蛋白质偶联制备出相应的人工完全抗原，这是半抗原免疫分析的关键所在。合成人工抗原的机理为：水溶性的N-羟基琥珀酰亚胺的羟基与奥沙普秦的羧基在脂溶性缩合剂二环己基碳二亚胺的作用下，脱水缩合形成活泼酯化奥沙普秦中间化合物，然后载体蛋白在某一PH值下，一般是大于其等电点，是蛋白质中的氨基暴露出来，从而成为提供伯胺的底物，然后亲核进攻活性中间产物活泼酯化奥沙普秦，从而达到小分子化学物偶联到载体蛋白的目的。　　ELISA技术的原理　　ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原分子上，形成酶标抗体/酶标抗原，称为酶结合物。该酶结合物的酶在免疫反应后，作用于底物使之呈色，根据颜色的有无和深浅，定位或定量抗原/抗体。ELISA法是免疫酶技术的一种，其特点是利用聚苯乙烯微量反应板(或球)吸附抗原/抗体，使之固相化，免疫反应和酶促反应都在其中进行。在每次反应后都要反复洗涤，这既保证了反应的定量关系，也避免了末反应的游离抗体/抗原的分离步骤。在ELISA法中．酶促反应只进行一次，而抗原、抗体的免疫反应可进行一次或数次，即可用二抗(抗抗体)、三抗再次进行免疫反应。　　目前常用的几种ELISA方法有：测定抗体的间接法，测定抗原的双抗体夹心法和测定抗原的竞争法等。　　ELISA竞争抑制法的原理　　包被好的抗原与加入的抗原形成竞争，如果抗体石特异性抗体，它就会与游离的标准抗原结合，而不与板上的检测　　抗原结合，从而被洗液洗掉而不显色。如果是非特异性抗体，则与板上的检测抗原结合显色。　　血清ELISA效价测定　　参照Li等报道的方法，采用间接ELISA测定免疫兔血清的抗体的效价。　　(1)、对应的检测抗原稀释到相应的梯度倍数。　　(2)、包板→摄氏度孵育2个小时。　　(3)、洗板；　　(4)、3%的明胶用超纯水稀释10倍，→封板，每个孔的用量为150微升；　　(5)、摄氏度孵育2个小时→洗板；　　(6)、加入对应的人工检测抗体，每个孔的用量为100微升；空白处不加抗体，但加等量的的PBST　　溶液　　(7)、摄氏度孵育40分钟→洗板；　　(8)、加酶标抗体，每个孔的用量为100微升　　(9)、摄氏度孵育40分钟→洗板；　　(10)、加底物，每个孔的用量为100微升；　　(11)、摄氏度孵育2-3分钟→显色。　　(12)、加终止液，每个孔用量50微升　　(13)、用酶标仪读数　　(14)、做好数据记录　　ELISA竞争抑制法阻断　　(1)、用对应的检测抗原来包板；　　每个孔用量100ul。　　(2)、摄氏度恒温孵育2小时→洗板。　　(3)、用%的明胶封板；每个孔的用量为ul。　　(4)、摄氏度恒温孵育2小时→洗板。　　(5)、用对应的标准液稀释后加入酶标板，每个孔的用　　量为50ul；空白处不加标准液，加的PBST50ul；　　(6)、用对应的血清抗体配至相应浓度梯度加入酶标板，每个孔的用量为50ul，　　(3)、摄氏度