大肠杆菌的培养.docVIP

大肠杆菌种子液的制备 牛肉膏蛋白胨培养基的配方： 液体培养基 牛肉膏 3.0g 蛋白胨 10.0g 氯化钠 5.0g 水 1000ml pH 7.4-7.6 固体培养基在液体培养基的基础上再加入1.5％－2.0％的琼脂 1 试管斜面与平板的制备 称量 按培养基配方比例依次准确称取蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂、水放入烧杯中。 熔化 在上述烧杯中先加入少于所需要量的水，用玻璃棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解，药品完全溶解后，补充水到所需的总体积。将称量好的1.8％琼脂放入已溶的药品中，再加热熔化，最后补充所损失的水分。 调PH 在未调PH前，先用精密PH试纸测量培养基的原始PH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌，并随时用PH试纸测基PH直到PH达到7.4-7.6。反之用1mol/L HCl进行调节。 分装 将培养基分装入三个试管中和三角烧瓶中。其试管装量不超过管高的1/5，三角烧瓶的量不超过1/2加塞 培养基分装完毕后，在试管口和三角烧瓶口上塞上棉塞。 包扎 加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、配制日期。 灭菌 将上述培养基以0.1Mpa,121℃,15min 倒平板 ，取三个已消毒的培养皿，在无菌操作台上用三角烧瓶中的培养基倒制