实验17 动物组织核酸提取与鉴定.pptVIP

动物组织中DNA的提取与鉴定 实验目的 掌握动物组织中DNA提取的原理和操作过程 了解DNA的组分，掌握DNA的定性检测的具体方法 掌握DNA纯度检测和浓度测定方法 实验原理—DNA提取 动物组织细胞中的核糖核酸(RNA)与脱氧核糖核酸(DNA)大部分与蛋白质结合形成核蛋白。RNA核蛋白和DNA核蛋白在不同浓度氯化钠溶液中的溶解度有显著区别。DNA核蛋白在0.14 mol/L 氯化钠中溶解度低，但在1 – 2 mol/L氯化钠中溶解度高；RNA核蛋白在0.14 mol/L氯化钠中溶解度仍有相当大的溶解度。调节氯化钠浓度，可使RNA核蛋白和DNA核蛋白分步提取开来。 氯仿-异戊醇溶液可以使核蛋白变性沉淀，将核酸物质萃取出来；再向萃取液中加入适量乙醇，可使DNA析出。氯仿异戊醇抽提和乙醇沉淀方法在DNA纯化研究中非常常用，氯仿-异戊醇抽提的原理是，氯仿可使蛋白质变性并加速有机相与液相分层；异戊醇有助于消除抽提过程中产生的气泡。而DNA不溶于乙醇等有机溶剂，因此可以通过乙醇沉淀来纯化和浓缩DNA。 实验原理—DNA鉴定 DNA是由脱氧核糖核苷酸单体构成，其组成部分包括磷酸、有机碱（嘌呤与嘧啶）、戊糖（脱氧核糖）。 1）磷酸