改良组织块酶消化法原代培养人牙髓干细胞的研究.pdfVIP

·166 · 口腔疾病防治 2018年3月 第26卷 第3期 ［DOI］10.12016/j.issn.2096⁃1456.2018.03.005 ·基础研究 · 改良组织块酶消化法原代培养人牙髓干细胞的 研究 1 2 3 刘影 ， 高杰 ， 吴补领 1. 南方医科大学口腔医院牙体牙髓科，广东 广州（510280）； 2. 广州医科大学口腔医学院，广东 广州 （510182）；3. 南方医科大学南方医院，南方医科大学口腔医学院，广东广州（510515） 【摘要】 目的 探索应用改良组织块酶消化法原代培养人牙髓干细胞并对细胞进行鉴定。方法 选取 18～26岁健康人因正畸或阻生而拔除的健康、完整、无龋坏的牙齿30颗，采用改良组织块酶消化法原代 培养人牙髓干细胞并通过对细胞的形态观察、细胞表面标记物检测、多向分化能力检测和生长曲线检测等方法 鉴定人牙髓干细胞。结果 对人牙髓组织经改良组织块酶消化法原代培养得到的细胞形态类似于成纤维细胞 和间充质细胞，生长曲线为S型，细胞表面标记物检测显示间充质干细胞标记物CD29、CD44、CD90表达阳性，造 血干细胞表面标记物CD34、CD45、CD106表达阴性，同时细胞具有多向细胞分化的能力。结论 应用改良组织 块酶消化法可以从人牙髓组织中成功原代培养人牙髓干细胞。 【关键词】 人牙髓干细胞； 组织块酶消化法； 原代培养； 细胞鉴定 【中图分类号】 R781.05 【文献标志码】 A 【文章编号】 2096⁃1456（2018）03⁃0166⁃05 【引用著录格式】 刘影，高杰，吴补领.改良组织块酶消化法原代培养人牙髓干细胞的研究[J]. 口腔疾病防 治,2018,26(3): 166⁃170. 1 2 PrimarycultureofhPDSCswithmodifiedenzymaticdigestion⁃explantsmethod LIUYing,GAOJie,WU Buling. 1.StomatologicalHospital,SouthernMedicalUniversity,Guangzhou510280,China;2.DepartmentofStoma⁃3 tology,GuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou 510182,China; 3.NanfangHospital,SouthernMedicalUniversity StomatologicalCollegeofSouthernMedicalUniversity,Guangzhou510515,China Correspondingauthor:WUBuling,Email:bulingwu0605@,Tel:0086⁃20 【Abstract】 Objective ToexploremethodsusingmodifiedtissueenzymaticseparationsforculturingprimaryhDP⁃ SCs invitro andfurtheridentifythecellsproduced. Methods PrimaryhDPSCswereculturedusingthemodifiedtis⁃ sueenzymaticseparationmethod,andcellswereidentifiedbymorphology,cellsurfacemarkers,anddifferentiationpo⁃ tentialandevaluatedusingflowcytometryandgrowthcurves. Results ThehDPSCsweresuccessfullyisolatedusing themodifiedtissueenzymaticseparationmethod.Themorphologyofthesecellswassimilartothatoffibroblastsand