毛白杨花青素合酶基因的克隆与特性分析.pdf

网络出版时间：2018-03-09 17:04:01 网络出版地址：/kcms/detail/31.2035.Q1703.024.html 中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2018, 40(3): DOI: 10.11844/cj cb.2018.03.0337 毛白杨花青素合酶基因的克隆与特性分析 姚建忠* ( 山西省桑干河杨树丰产林实验局林业科技服务中心, 朔州038399) 摘要 花青素合酶(anthocyanidin synthase, ANS)是植物中花青素合成代谢途径的关键酶之 一, 它可以催化无色花青素转化为有色花青素这一关键步骤。为了研究毛白杨花青素合酶基因功 能并最终利用其进行叶色基因工程改良, 在分析已有毛白杨转录组数据的基础上, 设计了两对PCR ANS 引物, 以毛白杨叶片基因组DNA为模板, 采用PCR技术分离克隆了毛白杨 基因两个成员, 命名为 PtANS1 PtANS2 、 。测序结果表明, 基因序列全长分别为1 694 bp 、1 820 bp, CDS长度均为1 083 bp, 编码360个氨基酸, 两者氨基酸序列一致性为88.3%, 相似性达到91.9%。结构分析表明, PtANS1和 PtANS2 均包含2个外显子和1个内含子, 基因结构高度相似, 二者氨基酸序列中均包含有1个2OG- FeII_Oxy保守域, 但分别定位于1号和3号染色体上。氨基酸序列同源性分析和进化分析表明, PtANS1和PtANS2 与可可、荔枝、葡萄和拟南芥的距离较近, 具有较高的同源性。进一步的转录组 数据分析显示, PtANS1和PtANS2在不同组织器官中的表达趋势十分相似, 但两者的表达量存在明 PtANS2 PtANS1 PtANS2 显差异, 在各组织器官中 与 相对表达量比值达到5~506倍, 推测 基因可能在杨 树色素合成及其他生理生化功能方面发挥着更重要的作用。这一重要发现将为进一步深入探究杨 树花青素合酶基因的功能奠定良好的基础。 关键词 毛白杨; 花青素合酶; 基因克隆; 表达模式 Molecular Cloning and Characterization of Two Genes Encoding Anthocyanin Synthase from Populus tomentosa Yao Jianzhong* (Forestry Science and Technology Service Center of Sangganhe Poplar High Yield Forest Experiment Bureau Shanxi Province, Shuozhou 038399, China) Abstra