赤灵芝中醇溶性蛋白提取工艺研究-中国医药生物技术.PDF

中国医药生物技术 2009 年 10 月第 4 卷第 5 期 Chin Med Biotechnol, October 2009, Vol. 4, No. 5 359 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2009.05.008 ·论著· 赤灵芝中醇溶性蛋白提取工艺研究 敖宏，黄生权，陈建旭，曾庆孝 【摘要】 1 材料与方法 目的 研究不同工艺参数对赤灵芝醇溶性蛋白提取率的影 1.1 材料 响，为探索赤灵芝醇溶性蛋白的工业化生产提供参考。 赤灵芝样品由浙江龙泉市科达农副产品有限 方法 以赤灵芝为原料，采用乙醇提取醇溶性蛋白，并通过 公司提供，产地为浙江龙泉灵芝栽培基地，经中科 单因素实验和正交实验研究浸提时间、温度、pH 、液料比 院微生物研究所卯晓岚研究员鉴定为人工栽培赤 及提取次数对醇溶性蛋白提取率的影响，确定赤灵芝醇溶性 芝（Ganoderma Lucidum）；标准牛血清白蛋白购自 蛋白提取的最佳工艺。 上海伯奥生物科技有限公司，批号 070903 ；考马 斯亮蓝 G-250 购自上海伯奥生物科技有限公司，批 结果 单因素实验结果表明，提取时间 2 h ，料液比 1 :40 ， 号 080605 ；其它化学试剂如 NaOH 、CuSO ·5H O、 醇溶性蛋白含量最高。正交实验得出各因素对灵芝醇溶性蛋 4 2 K SO 、浓 H SO 、无水乙醇、H PO 和硼酸等均 白提取率的影响程度大小依次为：pH 值 料液比 提取 2 4 2 4 3 4 为分析纯。pHS-25 型 pH 计为上海精密科学仪器 温度 乙醇浓度，醇溶性蛋白提取的最佳工艺参数为：乙 有限公司产品；Spectrumlab22p 分光光度计为上海 醇浓度 70% ，pH 2.5 ，料液比 1 :40 ，提取温度 60 ℃。 棱光技术有限公司产品；DHG-9000A 型电热恒温 结论 通过单因素实验和正交实验确定了赤灵芝醇溶性蛋 鼓风干燥箱为上海博讯实业有限公司医疗设备厂 白的最佳提取工艺参数，为赤灵芝醇溶性蛋白的工业化生产 产品；KDN-04A 定氮仪为上海新嘉电子有限公司 提供了参考依据。 产品。 【关键词】 灵芝； 正交试验 1.2 方法 中国医药生物技术, 2009, 4(5):359-363 1.2.1 测定方法 采用凯氏定氮法（GB5511- 1985）和考马斯亮蓝 G-250 法[4]测定样品中蛋白质 灵芝[Ganoderma Lucidum (Leyss.ex Fr.) Karst.] 的含量，采用 105 ℃ 恒重法（GB5512-1985 ）测 是担子菌纲、多孔菌科、灵芝属的真菌，在我国有 定样品中水分的含量。 两千多年的药用史。灵芝的药用成分非常丰富，已 1.2.2 赤灵芝粉的制备 将赤灵芝子实体置于 分离到的有效成分就有数十种之多，灵芝蛋白质是