牛樟芝中一个新型还原型聚酮合酶基因的克隆及表达分析.pdfVIP

－ 　 Ｇｕｉｈａｉａ － ｈｔｔｐ:/ / ｗｗｗ.ｇｕｉｈａｉａ ｊｏｕｒｎａｌ.ｃｏｍ 　 Ｓｐｅｔ.２０１８ꎬ３８(９):１１４６ １１５４ ＤＯＩ:１０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１７０８０３７ － 引文格式:原晓龙ꎬ华梅ꎬ陈剑ꎬ等.牛樟芝中一个新型还原型聚酮合酶基因的克隆及表达分析 [Ｊ].广西植物ꎬ２０１８ꎬ３８(９):１１４６ １１５４ ＹＵＡＮＸＬꎬＨＵＡ ＭꎬＣＨＥＮＪꎬｅｔ ａｌ. Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｐｏｌｙｋｅｔｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ ｇｅｎｅ ｉｎＡｎｔｒｏｄｉａ ｃａｍｐｈｏｒａｔａ [Ｊ]. － Ｇｕｉｈａｉａꎬ２０１８ꎬ３８(９):１１４６ １１５４ 牛樟芝中一个新型还原型聚酮合酶基因的克隆及表达分析 原晓龙ꎬ华　 梅ꎬ 陈　 剑ꎬ王　 娟ꎬ杨宇明ꎬ王　 毅∗ ( 云南省林业科学院ꎬ云南省森林植物培育与开发利用重点实验室ꎬ国家林业局 云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室ꎬ昆明６５０２０４ ) 摘　 要:为了研究牛樟芝中ＰＫＳ基因与化合物之间的关系ꎬ该研究通过对牛樟芝基因组分析获得牛樟芝聚酮 合酶基因ꎬ以此序列为模板设计含有起始密码子和终止密码子的特异引物并以牛樟芝ｃＤＮＡ为模板克隆获得 一个高度还原型ＰＫＳ(ＨＲ￣ＰＫＳ)基因全长ꎬ命名为ＡｃＰＫＳ２ꎻ对ＡｃＰＫＳ２基因进行生物信息学分析ꎬ并比较该基 因在不同培养基上的表达量ꎮ 结果表明:ＡｃＰＫＳ２全长７ ８４２ ｂｐꎬ有２４个内含子ꎬ其外显子共编码２ ６１３个氨基 酸ꎬ该蛋白的相对分子质量为２９３.５ｋＤａ ꎬ理论等电点ｐＩ为５.７８ꎮ 用ＣＤＤ分析其结构域显示ꎬ该基因属于ＨＲ￣ ＰＫＳꎬ其结构域组织排列为 ＫＳ￣ＡＴ￣ＤＨ￣ＭＴ￣ＥＲ￣ＫＲ￣ＡＣＰ￣ＴＥꎬ８ 个结构域其活性位点分别为 β￣酮基合成酶 (ＤＴＡＣＳＳＳＬ)、酰基转移酶(ＧＨＳＩＧＥＴＡ)、脱水酶(ＲＮＤＧＳＴＳＰＬ)、甲基转移酶(ＳＦＤＩＩＴＡＦＤＶ)、烯酰还原酶 (ＨＡＧＶＳＳＰＡＡ)、酮基还原酶(ＧＳＰＧＱＡＮＹＴＡＡ)、酰基转移酶(ＹＧＬＤＳＬＴＳＶＲＬ)、硫酯酶(ＫＱＰＮＧＰＹ)ꎮ 系统发 育树显示ＡｃＰＫＳ２与其他化合物未知的ＨＲ￣ＰＫＳ蛋白聚为一支ꎬ结构域和系统进化树分析显示该基因可能编 码一种新的含ＴＥ结构域高度还原型聚酮合酶ꎻ表达分析结果显示葡萄糖和果糖能够诱导该基因的表达ꎮ 关键词:牛樟芝ꎬ高度还原型ＰＫＳꎬ生物信息学分析ꎬ基因表达 中图分类号:Ｑ９３９.９２　 　 文献标识码:Ａ　 　 文章编号:１０００￣３１４２(２０１８)０９￣１１４６￣０９ Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｐｏｌｙｋｅｔｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ ｇｅｎｅ ｉｎＡｎｔｒｏｄｉａ ｃａｍｐｈｏｒａｔａ ＹＵＡＮＸｉａｏｌｏｎｇꎬＨＵＡ ＭｅｉꎬＣＨＥＮＪｉａｎꎬＷＡＮＧＪｕａｎꎬＹａｎｇ ＹｕｍｉｎｇꎬＷａｎｇ Ｙｉ∗ ( ＹｕｎｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＫｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｄＥｘｐｌｏｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔ ＰｌａｎｔｓꎬＫｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ＲａｒｅꎬＥｎｄａｎｇｅｒ ＆ Ｅｎｄｅｍｉｃ Ｆｏｒｅｓｔ ＰｌａｎｔｓꎬＳｔａｔｅ ＦｏｒｅｓｔｒｙＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎꎬＹｕｎｎａｎＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ ＦｏｒｅｓｔｒｙꎬＫｕｎｍｉｎｇ ６５０２０４ꎬＣｈｉｎａ ) Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｗｅ ｉｓｏｌａｔ