抗角蛋白抗体对培养上皮细胞反应部位功能及相关机制研究-皮肤病与性病学专业毕业论文.docxVIP

、slis{fI一性奢一 、slis{f I一性奢一 秉承学校严谨的学风与优良的科学道嚣，本人声明所呈交的论文是藐个人 在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加 以标注和致谢的地方9}，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果， 不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。 申请学位论文与资料若有不实之处，本八承担一切相关责任。 论文作者签名：塑塑 日期 I’麓-产赣蠢_ 本人完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在较攻读 学位期闻论文工作的知识产权单位属第四军医大学。本八保证毕业离校后，发 表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为第四军医大学。学校有权保留送 交论文的复Ell件，允许论文被查阅和借阋；学校可以公布论文的全部或部分内 容(保密内容除外)，可以采用影印、 缩印或其他复制手段保存论文。 论文作者签各：塑壁 导并签各 r∽脚℃f～ 13辫：塑!!! 第四军医大学博士学位论文抗角蛋白抗体对培养上皮细臆反应部位、 第四军医大学博士学位论文 抗角蛋白抗体对培养上皮细臆反应部位、 功能及相关机制研究 研究生 武彩霞 指导教师 刘玉峰教授 高天文教授 第四军医大学西京医院皮肤科西安，710032 中文擅要 人体内广泛存在着天然自身抗体(natural autoantibody， NAA)，它们对维持机体内环境的自身稳定起着重要的作用。目前 国内外的学者已经不再把所有自身抗体看作是“可怕的自身毒 素”，认为NAA是天然存在的自身抗体网络的组成部分，积极参 与免疫系统自身稳定的调节。迄今为止已经发现并证实的NAA有 数百种，其中包括天然抗角蛋白自身抗体(anti．keratin autoantibody，AK auto Ab)。 AK auto Ab是天然自身抗体NAA家族成员之一，广泛存在 于正常人和多种动物体内，对皮肤的生理和病理过程具有重要调节 作用。自从Krogh等于1970年首先发现AK auto Ab以来，国际 上许多学者围绕AK auto Ab做了大量工作，如1watsuki等发现， 未经任何免疫处理的小鼠辟细胞可自发地产生AK auto Ab； Hintner的体外实验间接发现AK auto Ab可以促进单核臣噬细胞 对角蛋白凝集物的吞噬。本研究组自20世纪80年代中期开始对 AK auto Ab进行了较为深入、细致的研究，研究进展与国际同 步，某些方面已处于领先水平。所取得的主要进展有：①证实AK 第四军医大学博士学位论文 第四军医大学博士学位论文 2 auto Ab在正常人和多种动物体内广泛存在，明确其与皮肤多种生 理和病理过程密切相关；②发现AK auto Ab能够抑制培养角质形 成细胞(keratinoeyte，KC)的增殖代谢，可以抑制KC产生免疫介 质如IL．6、IL．8，促进KC凋亡；首次提出AK auto Ab作为一种 生理机制在维持皮肤自身稳定中具有重要作用。③利用未免疫小鼠 B细胞获得了4株分泌AK auto Ab的杂交癯，克隆了抗体的可变 区基因，发现其符合NAA的规律。④利用噬菌体抗体库技术获得 了多株抗角蛋白基因工程抗体。⑤对AK auto Ab进行了应用研 究，初步结果显示AK auto Ab在银屑病治疗等方面具有良好的临 床应用前景。 在上述关于AK auto Ab的研究中，最重要的发现之一是AK auto Ab可以抑制培养的角质形成细胞及鳞癌细胞增殖。亲和层析 纯化的血清AK auto Ab、鼠源性单克隆抗角蛋白抗体、基因工程抗 角蛋白抗体都可显示这一抑制作用。但是AK auto Ab发挥这一作 用的机理目前尚未完全阐明。以往用AK auto Ab作用固定后角质 形成细胞(死细胞)结合对象是角质形成细胞胞浆内的角蛋白，而 且还证实AK auto Ab对不表达表皮角蛋白的细胞不具此作用，因 此，我们推测AK auto Ab进入体外培养细胞(活细胞)胞浆与角 蛋白结合是其发挥作用的基础。那么胞外的AK autoAb是如何与活 细胞胞浆内的角蛋白结合?AK autoAb与角蛋白结合后又发生了怎 样的一系列事件而导致了角质形成细胞的增殖抑制?这些问题成为 我们目前关注的焦点。 过去普遍认为，抗体发挥其生物学活性的区域仅限于细胞外介 质，而细胞内介质是抗体的禁区。但近年来大量资料显示，这种抗 体内化现象广泛存在。抗体能够穿透活细胞进入细胞内与细胞核或 耋 第四军医大学博士学位论文细胞浆内相应抗原结合，干扰细胞功能，引起细胞凋亡或死亡。从 第四军医大学博士学位论文 细胞浆内相应抗原结合，干扰细胞功能，引起细胞凋亡或死亡。从 而提示AK