观察酵母菌实验报告.docxVIP

观察酵母菌实验报告 　　酵母菌形态观察实验报告单　　班级日期姓名实验目的　　认识酵母菌的形态结构，掌握其观察方法。　　实验内容　　1．酵母菌菌落特征的观察　　2．酵母菌细胞形态及芽殖方式　　3．液泡的活体染色观察　　4．肝糖粒染色观察　　5．脂肪粒染色观察　　实验原理　　酵母菌是单细胞真菌，通常呈圆形、椭圆形或卵圆形，其菌落较大而厚，湿润，较光滑，颜色多为乳白、灰黄、淡黄、灰褐色，少见粉红或红色，偶见黑色。酵母菌个体比细菌大几倍到十几倍，　　在高倍镜下即能观察清楚。细胞内常有明显的细胞核及其内含物。无性繁殖以芽殖为主，在细胞的一端初生小突起如芽，逐渐增大，芽缢裂而与母细胞分离，形成独立的菌体。发生的芽如不立即脱离母细胞并继续出芽，则多数芽细胞集聚成芽簇。在陈旧培养中，芽簇细胞伸长成丝状，称假菌丝。　　酵母菌的有性生殖形成子囊袍子，其过程由两个菌休细胞结合后，其中配合的细胞核分裂，形成2个、4个或8个子囊孢子。　　实验器材　　酿酒酵母培养物　　显微镜、载玻片、盖玻片、接种针　　％美蓝液、中性红染色液、碘液　　实验步骤　　1．菌落特征的观察　　取少量酿酒酵母划线接种在土豆平板培养基上，28—30℃养3—5d。用肉眼观察菌落特征，项目包括菌落表面湿润或干燥、有无光泽、隆起形状、边缘形状、大小、颜色等。　　2．酵母菌细胞形态及芽殖方式　　在洁净载玻片上滴加一滴无菌水或%美蓝液一滴，用接种环取酵母菌菌台少许与无菌水或美蓝液混匀，盖上盖玻片，即成为水浸片。用高倍镜观察酵母细胞形态及出芽情况。　　染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察　　3．液泡的活体染色观察　　在洁净的载玻片上滴加一滴中性红染色液，用接种环取少量酿洒酵母与染液混匀，染色4—5min后，盖上盖玻片在显微镜下观察。中性红是液泡的活体　　染色剂，当细胞处于生活状态时，液泡被染成红色，细胞质及核不着色；若细胞死亡，液泡染色消失，细胞质及核呈现弥散性红色。　　4．肝糖粒染色观察　　用酿酒酵母涂片，自然干燥后滴加1—2滴碘液，盖上盖玻片后在显微镜下观察。肝糖粒遇碘呈深红褐色。　　5．脂肪粒染色观察　　加一小滴苏丹黑于洁净的载破片上，挑取少许酵母菌体与之混匀，盖上盖玻片后镜检。脂肪粒呈黑色。　　实验结果及讨论　　1．实验结果　　绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征。　　2．讨论　　针对实验原理、步骤、现象进行讨论。　　山东大学实验报告XX年11月日　　姓名郑冲冲系年级08级生科一班组别同组者张健康于政达　　学号XX题目酵母菌的培养、形态观察、死活鉴定和子囊孢子的观察　　一、目的要求　　1、掌握酵母培养基的配置和酵母菌的接种方法2、观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式。3、学习掌握区分酵母菌死、活细胞的实验方法。4、学习并掌握酵母菌子囊孢子的观察方法。二、基本原理　　1、培养基：酵母菌的能源主要是糖，一般用麦芽汁琼脂培养基培养。但实验要求不是很严格时，可以用由酵母膏、蛋白胨、葡萄糖配置的培养基来培养；但酵母菌子囊孢子的观察要用麦氏培养基，其有利于子囊孢子的形成。　　2、酵母菌的形态：酵母菌是多形的、不运动的单细胞真核微生物，菌体比细菌大。繁殖方式也较复杂，无性繁殖主要是出芽生殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过用美蓝染色浸片和水-碘液来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。　　3、美蓝染色液：美蓝为无毒性染料，其氧化型为蓝色，而还原型为无色。用它对酵母菌染色时，由于活细胞的新陈代谢作用，使细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型，所以酵母的活细胞无色；对于死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此，用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态，还可以区分死、活细胞。　　4、水-碘液染色液：该染液将革兰氏染液用碘液用水稀释4倍后得到的，亦可用于酵母形态和出芽生殖的观察。　　4、子囊孢子的观察：酵母菌形成子囊孢子需要一定的条件，麦氏培养基有利于酿酒酵母子囊孢子的形成，能否形成子囊孢子及其形态是酵母菌分类鉴定的重要依据之一。三、实验器材　　1.菌种：酿酒酵母培养数天的酵母-麦氏培养基斜面　　2.溶液与试剂：%吕氏碱性美蓝染液，5%孔雀绿，%沙黄、95%乙醇，水-碘染液3.培养基：酵母液体培养基，麦氏培养基。　　4.仪器或其他用具：显微镜，载玻片，盖玻片，酒精灯、接种环等。四、实验步骤1、酵母培养基的配置：蛋白质2%，酵母膏1%葡萄糖2%，加冷水100Ml，自然PH，在115℃下高压蒸汽灭菌30min。2、接种和培养：无菌操作下，在灭菌的培养基中倒入少许酵