血检报告尿素含量低.docxVIP

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血检报告尿素含量低   【目的】学习血清尿素(Urea)测定方法,了解其意义。   【原理】血清尿素是蛋白质的正常代谢产物。它的测定是常用的衡量肾小球功能的指标之一。肾性血清尿素含量增加,提示肾小球损伤。是研究药物肾毒性的重要指标之一。   【器材】兔固定架、注射器、烧杯、可见分光光度计、试管、水浴   【药品】%氯化高汞溶液、生理盐水   【动物】家兔2只   【方法】取家兔2只,1只注射氯化高汞5ml/kg:称取干燥纯尿素(MW=),溶解于蒸馏水中,并稀释至100ml,加叠氮钠防腐,置冰箱内可稳定半年。   (4)尿素标准液应用液(5mmol/L):取贮存液用无氨蒸馏水稀释至100ml.   【操作】按表T4-1进行   混匀后,置沸水中加热12分钟,置冷水中冷却5分钟后,用分光光度计在波长540nm,以空白管调至零点。比色读取标准管及测定管的吸光度。   【计算】   【正常参考值】   ~/L尿素   【注意事项】   1.本法线性范围达14mmol/L尿素,如遇高于此浓度的标本必须用生理盐水作适当的稀释后重测,然后乘以稀释倍数报告之。   2.试剂中加入硫氨脲和镉离子,增进显色强度和色泽稳定性,但仍有轻度退色现象(每小时小于5%)。加热显色冷却后应及时比色。   3.吸管必须校正,使用时务必注意清洁干净,加量务必准确。   4.世界卫生组织推荐用mmol/L尿素表示浓度,不再使用尿素氮一词。   5.血清尿素增高的病理因素常见于肾脏原因,肾脏原因又可分为肾性、肾前或肾后:①肾性:急性肾小球肾炎、肾病晚期、肾功能衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎都可见血液中尿素含量增高。②肾前或肾后:引起尿量显著减少或尿闭,如脱水、水肿、腹水、循环功能衰竭、尿路结石或前列腺肿大引起的尿路梗阻等均可引起血清尿素含量升高。此外,生理因素也可导致血清尿素增高。如体内蛋白质分解过多:急性传染病、上消化道出血、大面积烧伤、大手术后和甲状腺功能抗进等。虽然血清尿素增高,此时其它肾功能试验结果一般均正常。   尿素的测定方法可分为两大类:一类直接法,尿素直接和某试剂作用,测定其产物,最常见的为二乙酰一肟法;另一类是尿素酶法,用尿素酶将尿素变成氨,然后用不同的方法测定氨。1)尿素酶法:尿素酶法利用尿素酶催化尿素水解生成铵盐,铵盐可用纳氏试剂直接显色、酚-次氯酸盐显色或酶偶联反应显色。尿素测定目前多采用尿素酶偶联法:用尿素酶分解尿素产生氨,氨在谷氨酸脱氢酶的作用下使NADH氧化为NAD+时,通过340nm吸光度的降低值可计算出尿素含量。此反应是目前自动生化分析仪上常用的测定原理。此外,尿素酶水解尿素产生氨的速率,也可用电导的方法进行测定,其电导的增加与氨离子浓度有关,反应只需要很短的时间,适用于自动分析仪。2)酚-次氯酸盐显色法:尿素酶水解尿素生成氨和酚及次氯酸盐,在碱性环境中作用形成对-醌氯亚胺,亚硝基铁氰化钠催化此反应:对-醌氯亚胺同另一分子的酚作用,形成吲哚酚,它在碱性溶液中产生蓝色的解离型吲哚酚:此反应敏感,血清用量少,无需蛋白沉淀,一般用于手工操作测定中。3)纳氏试剂显色法:尿素经尿素酶作用后生成氨,氨可与纳氏试剂作用,生成棕黄色的碘化双汞铵。尿素酶法的优点是反应专一,特异性强,不受尿素类似物的影响,缺点是操作费时,且受体液中氨的影响。⑵二乙酰一肟法:尿素可与二乙酰作用,在强酸加热的条件下,生成粉红色的二   嗪化合物,在540nm比色,其颜色强度与尿素含量成正比。二乙酰不稳定,用二乙酰一肟代替,后者遇酸水解成二乙酰。试剂中加入Fe3+或Cd2+及硫氨脲,可提高灵敏度,增加显色稳定性,其中Fe3+和Cd2+有氧化作用,还能消除羟胺的干扰作用。提高酸的浓度可增加灵敏度。二乙酰一肟与尿素的反应不是专一的,与瓜氨酸也有显色。本法灵敏、简单,产生的颜色稳定,缺点是加热时有异味释放,一般临床已很少使用此方法。尿素测定用血清或血浆,体液中尿素的浓度常用尿素中含有的氮来表示,称为尿素氮。如欲换算成尿素,可根据60g尿素含有28g氮计算,即1g尿素相当于尿素氮,或是1g尿素氮相当于尿素。正常参考值:血清尿素氮为/L,相当于尿素/L。   一般血液檢查   HCT:血容比,紅血球的體積在全部血液中的體積所佔的百分比。   看低於正常值的程度能明確了解貧血的程度   相反的,如果升高,則可能有脫水症或紅血球增多症。   HGB:血紅素   偏低:貧血如缺鐵性貧血、再生障礙性貧血、溶血性貧血等   升高:主要可見於缺氧如阻塞性肺氣腫、肺源性心臟病及紫紺型先天性心臟病的相對性增加和真性紅血球增多症的絕對增高。   MCHC:平均血球血紅素濃度。   測血中紅血球、血紅素之濃度,   升高時為正色素性貧血;減低時為低色素性貧血。   WBC:白血球   當體內有病菌入

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