黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫生物活性及作用方式的研究-农业昆虫与害虫防治专业毕业论文.docxVIP

Y Y 60177,1 关于学位论文原创性和使用授权的声明 本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研 究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要 贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本 人承担。 本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规 定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质 本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可 以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可 以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 保密论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名： 导师签名： 曰 期： 丛单一 山东农业大学硕士学位论文摘 山东农业大学硕士学位论文 摘 要 黄荆(Vi}ex negundo Linn．)属马鞭草科，黄荆属。在我国分布广 泛，山东泰山野生资源非常丰富。本文以为害十字花科蔬菜的重要害虫小 菜蛾和菜青虫为主要对象，系统研究了黄荆杀虫活性物质的提取方法、作 用方式，并初步探讨了其作用机理。为进一步开发利用这一野生杀虫植物 资源和未来仿生合成奠定基础，对害虫的可持续治理具有重要的理论和实 践意义。主要研究结果如下： 1．明确了黄荆杀虫活性物质的提取条件和方法。选用二氯甲烷、石油 醚、丙酮、甲醇和乙醇j种极性不同的有机溶剂，采用冷浸法，分别提取 黄荆的种子和叶片中的活性物质，提取液经抽滤、净化、浓缩得到膏状纯 品。筛选出适宜的替换溶剂和乳化剂。通过对小菜蛾的杀虫活性测定，明 确了二氯甲烷种子提取物杀虫活性最高，二氯甲烷叶子提取物次之，甲醇 和石油醚提取物活性较差，乙醇和丙酮提取物的杀虫活性最差。筛选出 25。C作为适宜的二氯甲烷种子提取物的提取温度。综合分析明确黄荆种子 是提取黄荆杀虫活性成分的最佳原材料。 2．黄荆提取物对小菜蛾、菜青虫、荻草谷网蚜和桃蚜均表现出高的杀 虫活性；对天敌异色瓢虫安全性好。用二氯甲烷种子提取物4 mg／ml剂量 处理小菜蛾3龄幼虫、菜青虫4龄幼虫、荻草谷网蚜和桃蚜的无翅成蚜， 24h的校正死亡率分别为78．3％、91．7％、79．6％和75．7％。用相同剂 量处理异色瓢虫成虫和4龄幼虫，处理后24h死亡率分别为O％和15％，对 成虫安全，对幼虫存活略有影响。 3．系统研究黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫不同龄期幼虫的触杀毒力。 二氯甲烷种子提取物对1龄、2龄、3龄和4龄小菜蛾幼虫的Lc。分别为 0．474 mg／ml、0．835 mg／ml、1．707mg／ml和1．832 mg／ml；对菜青虫2．4 龄幼虫的Lc。为0．641 mg／ml和1．328mg／ml；龄期之间毒力差异显著，对 小菜蛾1龄幼虫的毒力是4龄虫的3．86倍，菜青虫2龄幼虫的毒力是4 龄虫的2．07倍。 4。黄荆提取物对小菜蛾成虫产卵有明显的忌避作用。其中以甲醇叶 黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫的生物活性及作用方式的研究片提取物和二氯甲烷种子提取物作用最强，在4mg／ml浓度下，选择忌避 黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫的生物活性及作用方式的研究 片提取物和二氯甲烷种子提取物作用最强，在4mg／ml浓度下，选择忌避 率分别为61．56％平D 55．40％；且有一定的持效性，处理后108小时忌避 率仍达40％以上。乙醇叶片提取物处理后24h选择忌避率在49．6％；甲 醇种提物、乙醇种提物和石油醚提取物的忌避作用则较差。 5．用黄N-氯甲烷种子提取物以4mg／ml浓度，对小菜蛾和菜青虫 卵的毒杀作用不明显，对小菜蛾和菜青虫幼虫基本无胃毒作用。 6、黄荆提取物对小菜蛾和菜青虫幼虫的取食量、生长发育和繁殖有 明显的影响。分别用二氯甲烷种子提取物和甲醇叶片提取物4mg／g浓度处 理寄主叶片，能导致小菜蛾3龄幼虫和菜青虫4龄幼虫的取食量明显下降。 用二氯甲烷种子提物LC。处理小菜蛾2、4龄幼虫和菜青虫4龄幼虫，存 活幼虫的化蛹率、蛹重、羽化率、成虫产卵量以及幼虫孵化率有明显下降， 而对发育历期影响不大。处理小菜蛾4龄幼虫比处理2龄幼虫效果更明显。 7、用黄荆二氯甲烷种提物处理小菜蛾和菜青虫幼虫后，其中毒症状 独特，能使虫体迅速瘫软、麻痹、死亡，亚致死剂量处理的试虫中毒后能 恢复。呼吸测定证明，试虫中毒后呼吸量急剧下降，复苏个体的呼吸量可 逐渐回升：呼吸量下降的幅度和回升的时间和幅度均决定于处理剂量。 8．黄荆提取物对菜青虫作用机制的初探得出，其二氯甲烷种子提取 物对幼虫体内乙酰胆碱酯酶有一定的抑制作用，处理后12h对乙酰胆碱酯 酶(AChE)比活力的抑制率为58．57％；而对离体酶的抑制作用更强，其 抑制效果与毒死蜱的作用效果相当，说明乙酰胆碱酯酶是黄荆提取物的主 要作用靶标之一。黄荆提取物对幼虫体内谷胱甘肽一S一转移酶(GST)和羧 酸酯酶(Car