绿鳍马面鲀性类固醇激素受体在生殖周期中的表达机制-水产养殖专业毕业论文.docxVIP

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  • 2019-05-14 发布于上海
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绿鳍马面鲀性类固醇激素受体在生殖周期中的表达机制-水产养殖专业毕业论文.docx

万方数据 万方数据 独创声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外 ,论文中不包含其他人己经 发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得 (注·在日没有其 他需要特别声明的,本栏可空)或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一 同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意 学位论文作者签名在衔砰轧签字日期 :y碑 μ伊日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国 家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或 扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名: 在倾机本 签字日期 :l,c(f年 6 月节日 币签字阶份 签字日步f)l c{ ,月声日 学位论文作者毕业后去向 : 工作单位: 通讯地址: 电话: 邮编 绿鳍马面鲀性类固醇激素受体在生殖周期中的表达机制 绿鳍马面鲀性类固醇激素受体在生殖周期中的表达机制 绿鳍马面鲀性类固醇激素受体在生殖周期中的表达机制 摘 要 绿鳍马面鲀(Navodon septentrionalis)是我国的重要经济鱼类,本研究以烟 台百佳水产公司人工养殖的绿鳍马面鲀为研究对象,对其进行为期一年的周期采 样。运用免疫组织化学和性类固醇激素放射免疫测定法,对绿鳍马面鲀的性腺和 血清性类固醇激素进行了深入研究和分析,并采用分子生物学方法对绿鳍马面鲀 性类固醇激素受体进行了基因克隆与表达分析,得出结果与结论如下: 1 绿鳍马面鲀性腺的免疫组织化学观察 对绿鳍马面鲀进行为期一年的隔月采样。对绿鳍马面鲀性腺中雌激素受体 α (ERα)和雄激素受体(AR)进行了定位,发现在卵巢、精巢发育的不同阶段 均存在两种受体的不同程度的表达。在卵巢中,ERα 在卵母细胞早期发育阶段呈 强的免疫阳性反应,而随着卵母细胞的成熟,AR 免疫反应逐渐增强,这都说明 雌激素及其受体对卵巢发育早期阶段起着关键作用,但雄激素及其受体对卵巢的 作用机制尚不明确;精巢中的 ERα 和 AR 在精子发生各个时期的间质细胞处均 有强阳性反应,在生殖细胞处 ERα 较 AR 有更高水平的表达,这说明雌激素及 其受体对精巢的发育成熟起到关键作用,雄激素及其受体对生殖细胞的发育、成 熟和维持也起着重要作用。 2 绿鳍马面鲀 ERs 基因的克隆与时空表达分析 本实验首次克隆到绿鳍马面鲀三种 ERs 基因:ERα cDNA 核心序列共 1410bp,编码 470 个氨基酸;ERβ1 cDNA 全长 2192bp,包含一个开放阅读框, 编码 565 个氨基酸;ERβ2 cDNA 全长 2363bp,包含一个开放阅读框,可以编码 662 个氨基酸。利用生物学软件将绿鳍马面鲀 ERs 的氨基酸序列与其它硬骨鱼类 及哺乳动物等进行多序列比对,发现了 ERs 的一些共有的结构特点,也发现了 绿鳍马面鲀 ERs 的一些特点。本实验采用 RT-PCR 方法,检测了 ERs 在性成熟 雌、雄鱼中 11 种组织中的分布情况,结果表明,绿鳍马面鲀 ERs 在雌鱼各组织 I 中较雄鱼的表达更广泛,包括一些非生殖组织,如鳃、肾脏和脾脏等都检测到 mRNA 表达,特别是绿鳍马面鲀 ERβ1 只在雄鱼性腺组织中检测到表达,其他组 织均未检测到表达信号。此外,结合血清 E2、T 及 GSI 的周年变化,对 ERs 在 性腺中的周年表达情况进行了分析,发现绿鳍马面鲀 ERs 与血清 E2 和 GSI 都呈 现出一定的相关性,这表明 E2 和 ERs 可能影响性腺的发育成熟。 3 绿鳍马面鲀 AR 基因的克隆与时空表达分析 本实验首次克隆到绿鳍马面鲀 AR 部分基因序列,得到 AR cDNA 核心序列 共 769bp,共编码 256 个氨基酸。利用生物学软件将该片段推导得到的氨基酸序 列与其它硬骨鱼类及哺乳动物等进行多序列比对,发现了该序列结构上的一些特 点。本实验采用 RT-PCR 方法,检测了 AR 基因在性成熟雌、雄鱼 11 种组织中 的分布情况,结果表明,该基因在雄鱼各组织中均有表达,仅在雌鱼的一些组织 中检测到表达信号,且在雄鱼各组织中的表达丰度高于雌鱼,并认为 AR 与 ARβ 更为接近。此外,结合血清 T 分析了 AR 在性腺组织中的周年变化情况,发现该 基因的转录水平与繁殖周期和血清 T 的含量存在密切关系。 关键词:绿鳍马面鲀;性腺;性类固醇激素;ER;AR II The expression mechanism of the sex steroid ho

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