环孢霉素A增强羟基喜树碱三尖杉酯碱对HL-60细胞凋亡的诱导.PPT

《环孢霉素A增强羟基喜树碱、三尖杉酯碱对HL-60细胞凋亡的诱导》 目的：观察环孢霉素A（CsA）对羟基喜树碱（HCPT）、三尖杉酯碱（HT）诱导白血病细胞凋亡的调节作用。细胞培养：HL-60细胞用含体积分数为10%的小牛血清的RPMI-1640培养液，在37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度下常规培养，每周换液2次。取指数生长期细胞进行实验。细胞诱导：实验分为6组，分别给予不同的实验条件，收集细胞，计算细胞凋亡率，结果见表4.15。统计学处理：用自身配对t检验。 分析 原作者采用配对t检验对资料进行处理，这是不正确的。因为配对设计资料的t检验仅适合分析配对设计的定量资料，且要求数据成对出现，每对数据测自同一个个体（称为自身配对设计）或同一个来源的两个个体（称为同源配对设计）或条件相近的两个个体（称为条件相近者配对设计），更重要的是配对设计只涉及一个具有2水平的因素。本实验的研究对象是用同一种细胞制备的细胞悬液，测量指标是细胞悬液经不同处理后单位容积中的 “细胞凋亡率”这一定量指标，表的第一列代表不同的实验组，表面上看是属于单因素6水平设计资料的6个不同水平，实则不然，这6个组包含了两个因素各水平的组合，一个因素是“用CsA与否”，它有两个水平，“用”与“不用”，另一个因素是“所加的药物”,它有三个水平，“无”、“HT”和“HCPT”，见表4.16。 分析 分析 由条件相同的细胞培养来的细胞群在这两个因素不同水平组合条件下被重复测量了6次，由每批实验所得到的6个数据之间具有一定的相关性，故本资料应为具有两个重复测量的两因素设计的资料。这里需要说明的是：在不同的组合条件下，需做多次（批）独立重复实验，即需采用不同批次的同种细胞群做实验，而不能始终用同一批次的细胞群在多个时间点上进行重复测量其“细胞凋亡率”，后者属于具有三个重复测量的三因素设计，且每个条件下只有一个实验数据，从实验设计的角度来说，违背了“重复”的原则，无法进行分析。 释疑 采用具有两个重复测量的两因素设计资料的方差分析对资料进行处理，不但可以消除数据之间相关性的影响，还可分析出各个因素及因素之间可能存在的交互作用的实验效应来。 * 41.269 0.001△ 44.3±0.8 CsA+HT组 17.916 0.001# 47.5±0.5 CsA+HCPT 42.951 0.001* 31.9±0.8 HT组 39.789 0.001* 35.7±1.3 HCPT组 0.060 0.05 6.9±0.6 CsA组 6.9±0.7 对照组 t值 P值 细胞凋亡率（%） 分组 表4.15 CsA增强HCPT、HT诱导HL-60细胞凋亡 对照组：未加凋亡诱导剂；CsA组：加CsA3μg/ml；HCPT组：加HCPT0.5μg/ml；HT组：加HT0.1μg/ml；CsA+HCPT组：CsA3μg/ml+HCPT0.5μg/ml；CsA+HT组：CsA3μg/ml+HT0.1μg/ml;对照组和CsA组实验重复4次，其余组实验重复6次。*与对照组比较；#与HCPT组比较；△与HT组比较 35.7±1.3 31.9±0.8 6.9±0.6 47.5±0.5 44.3±0.8 6.9±0.7 1～4 HCPT） HT (无 用CSA HCPT） HT (无 不用CSA 细胞凋亡率（%） 批次 表4.16 CsA、HCPT、HT对诱导HL-60细胞凋亡的影响（ ，%） 注：括号内为药物种类，“无”不加药，“HT”、“HCPT”分别为两种药，各处理组的实验批次应相同。 *