过渡元素与血红蛋白的作用及其结构研究硕士学位论文.doc

PAGE PAGE 2 过渡元素与血红蛋白的作用及其结构研究 目 录 中文摘要………………………………………………………………………i Abstract………………………………………………………………………ii 综 述 前言………………………………………………………………1 第一节 蛋白质同金属离子的相互作用研究进展…………………1 1.1. 过渡元素与蛋白质的相互作用………………………3 1.2. 稀土离子同蛋白质的相互作用………………………3 1.3. 贵金属同蛋白质的相互作用…………………………4 1.4. 重金属与蛋白质的相互作用…………………………5 1.5. 其它情况………………………………………………5 第二节 稳定常数测定………………………………………………6 第三节 蛋白质的结构研究 ………………………………………7 3.1 红外光谱……………………………………………8 3.2 核磁共振……………………………………………10 3.3 拉曼光谱…………………………………………11 3.4 X-ray衍射…………………………………………11 3.5 电子晶体学…………………………………………12 参考文献……………………………………………………………………13 第二章 过渡金属与血红蛋白的相互作用 第一节 实验部分…………………………………………………19 1.1 仪器、试剂及实验条件……………………………19 1.2 实验方法……………………………………………19 第二节 结果与讨论………………………………………………21 2.1 温度的影响…………………………………………21 2.2 反应时间的影响…………………………………21 2.3 平衡常数测定………………………………………22 2.4 红外光谱结构测定…………………………………24 参考文献……………………………………………………………………28 第三章 贵金属与血红蛋白的相互作用 第一节 实验部分…………………………………………………30 1.1 仪器、试剂及实验条件……………………………30 1.2 实验方法……………………………………………30 第二节 结果与讨论………………………………………………31 2.1 电子能谱研究………………………………………31 2.2 红外光谱解析………………………………………33 2.2.1. 血红蛋白的红外谱解析……………………33 2.2.2. 络合物的红外光谱解析……………………36 第三节 结论………………………………………………………38 参考文献……………………………………………………………………39 第四章 贵金属同过渡元素与血红蛋白作用的红外光谱研究 第一节 实验部分…………………………………………………41 1.1 仪器、试剂及实验条件…………………………41 1.2 实验方法……………………………………………41 第二节 结果与讨论………………………………………………42 2.1 血红蛋白的红外谱解析……………………………42 2.2 AuCu-Hb络合物的红外光谱解析…………………42 2.3 PtNi-Hb络合物的红外光谱解析…………………44 2.4 IrCo-Hb络合物的红外光谱解析…………………46 第三节 结论………………………………………………………49 参考文献……………………………………………………………………50 附 录 已发或待发文章 致 谢 摘 要 本文主要研究了牛血红蛋白（Hb）与多种金属离子相互作用的平衡常数及所生成络合物的结构。 用ICP-AES测定，根据Langmuir方程：ni/(ns-ni)=KC，作图计算了Cu2+与Hb结合的平衡常数（K）及Zn2+、Ni2+存在下对Cu2+与Hb结合平衡的影响，并用FTIR光谱对Hb及其金属络合物的结构进行了对比研究。结果表明，Zn2+对K的影响较大，使K值从3.461×103 l/mol变为2.198×103 l/mol，Ni2+的作用不很明显，Ni2+存在时的K值为3.208×103 另外，采用电子能谱技术研究了单核贵金属血红蛋白络合物中配位原子键合能的变化，并运用去卷积曲线拟合FTIR技术对固态Hb及其贵金属络合物红外酰胺I带（1700-1600 cm-1）中二级结构的各个成分进行了定量分析，对酰胺II带（1600-1500 cm-1）中二级结构的各个成分进行了初步指认。结果表明，Hb中的α-helix（1646.31cm-1）含量为71.0%，不含β-sheet结构，其它组分含量为29.0%，其中主要是转角结构（1691.43cm-1），这与