可乐中咖啡因的高效液相色谱法测定 实验化学四 (综合化学实验) 色谱法简介 混合物随流动相流经色谱柱时,由于个不同组分与固定相的相互作用强弱不同,从而使各组分按先后不同的顺序依次从固定相中流出。 这种利用个组分在两相中具有不同分配系数或吸附系数,使混合物中各组分分离的技术称为色谱法。 作用:分析 分离 流动相:携带样品流过固定相的流动体 固定相:固定不动的一相 按流动相的物态分: 气相色谱 液相色谱 高效液相色谱:在技术上采用了高压泵,高效固定相和高灵敏度检测器,实现了分析速度快,分离效率高和操作自动化。 高效液相色谱的分类: 液—液分配色谱法载体 全多孔型 表面多孔型 化学键合固定相:用化学反应的方法把有机分子结合到载体表面。(如实验所用的C18即十八烷基键合硅胶) 反相色谱优点: 能和水兼容 高效,稳定 适用于大部分物质,应用非常广泛 常被用于从极性溶液中或水相中萃取非极性物质 分析方法: 定性:根据保留值或与其相关的制进行判断,以确定各色谱峰代表何组分 定量:检测信号(峰面积、峰高等)大小与组分的量成正比关系 标准曲线法 归一化法 内标法 实验目的 了解液相色谱仪的基本结构和操作; 了解反相液相色谱法的原理、优点和应用; 掌握标准曲线定量方法。 咖啡因又称咖啡碱,化学名称为1,3
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