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贵 州 大 学
硕士研究生学位论文
固体发酵黑曲霉产单宁酶的研究
PAGE 56
目 录
TOC \o 1-3 \h \z \u 目 录 h i
中文摘要 h i
Abstract h ii
第一章 文献综述 h 1
1.1引言 h 1
1.2单宁酶的性质 h 2
1.2.1单宁酶的理化性质 h 2
1.2.2单宁酶的酶学性质 h 2
1.3 单宁酶分离纯化及菌株筛选 h 3
1.4单宁酶的酶活力测定 h 4
1.5单宁酶的固定化 h 5
1.5.1固定化酶的方法和特性 h 5
1.5.2单宁酶的固定化 h 5
1.6单宁酶的应用 h 6
1.6.1应用于食品工业 h 6
1.6.2制革工业 h 7
1.6.3饲料工业 h 7
1.6.4化妆品工业 h 7
1.6.5精细化工与制药工业 h 7
1.7本课题立题意义和研究内容 h 8
1.7.1本课题的立题意义 h 8
1.7.2本课题的研究内容 h 8
第二章 产单宁酶黑曲霉菌株的诱变及筛选 h 10
2.1前言 h 10
2.2材料与设备 h 10
2.2.1菌种 h 10
2.2.2培养基 h 10
2.2.3实验仪器 h 11
2.3实验方法 h 12
2.3.1实验菌种的培养及初步鉴定 h 12
2.3.2出发菌株的筛选 h 12
2.3.3紫外诱变 h 13
2.3.4复筛方法 h 13
2.3.5粗酶液的提取 h 13
2.3.6酶活测定方法 h 13
2.3.7单宁酶高活性菌株的产酶稳定性 h 13
2.4实验结果与讨论 h 14
2.4.1实验菌种的初步鉴定 h 14
2.4.2出发菌株的筛选 h 14
2.4.3紫外诱变筛选单宁酶高活性菌株 h 15
2.4.4单宁酶高活性菌株产酶稳定性 h 16
2.5本章小结 h 17
第三章 单宁酶活力测定方法的构建 h 18
3.1前言 h 18
3.2实验材料与方法 h 18
3.2.1 菌种 h 18
3.2.2培养基 h 19
3.2.4试剂 h 19
3.2.5仪器 h 19
3.2.5 实验方法 h 19
3.3 实验结果与讨论 h 21
3.3.1 没食子酸吸收峰波长 h 21
3.3.2 没食子酸标准曲线及其回归方程 h 22
3.3.3 单宁酶活力测定 h 23
3.3.4 单宁酶活力测定方法比较 h 23
3.4 本章小结 h 24
第四章 固体发酵黑曲霉产单宁酶研究 h 26
4.1前言 h 26
4.2实验材料与方法 h 26
4.2.1菌种 h 26
4.2.2培养基 h 26
4.2.3试剂 h 27
4.2.4仪器 h 27
4.2.5实验方法 h 27
4.3实验结果与讨论 h 30
4.3.1液体发酵法与固体发酵法的比较 h 30
4.3.2黑曲霉产单宁酶固体发酵单因素条件研究 h 31
4.3.3响应面优化结果 h 35
4.4单宁酶产酶活力曲线 h 39
4.5 结论 h 40
第五章 单宁酶的固定化 h 41
5.1前言 h 41
5.2实验材料 h 41
5.2.1菌种 h 41
5.2.2试剂 h 42
5.2.3仪器 h 42
5.3实验方法 h 42
5.3.1单宁酶粗酶液的提取 h 42
5.3.2单宁酶酶活测定 h 42
5.3.3以海藻酸钠为载体固定化单宁酶固定化方法的选择 h 42
5.3.4固定化单宁酶条件的优化 h 43
5.3.5固定化酶性质的研究 h 44
5.4实验结果与讨论 h 45
5.4.1海藻酸钠为载体固定化单宁酶固定化方法的选择 h 45
5.4.2固定化单宁酶的条件研究 h 45
5.4.3固定化酶的最适温度 h 49
5.4.4固定化酶的热稳定性 h 50
5.4.5固定化酶的最适ph h 50
5.4.6固定化酶的贮藏稳定性 h 51
5.5本章小结 h 51
第六章 结论与展望 h 52
6.1结论
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