实验2RT-PCR拟南芥叶片.pptxVIP

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2019-05-14 发布于湖北
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实验2RT-PCR拟南芥叶片.pptx

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实验二半定量RT-PCR分析拟南芥叶片PPH基因表达;实验目的;实验原理;内参基因的设定;关于PPH基因;Step1 拟南芥叶片总RNA提取;Step2 基因组DNA的去除 ★ ;PCR Buffer;① 98℃预变性3分钟后开始以下循环 ② 98℃ 30 sec Tm 30 sec 26 循环（PPH） 72℃ 1 min 72℃ 5 min 4 ℃ 保温 PCR过程约1小时20分钟;取 5-10 μL 的 PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳，根据条带亮度的不同来确定表达量的多少。在一次半定量 PCR 分析中，每个样品至少设两个重复。