三氧化二砷、艾叶油吸入防治哮喘机理的动物实验研究-内科学专业论文.docxVIP

三氧化二：：=砷、苴月I油吸入防描哮喘的动物实验研究 三氧化二：：=砷、苴月I油吸入防描哮喘的动物实验研究 中山大学碗士学位论文 三氧化二砷～样，对哮喘具有防治作用，因此将_：：：=者共用，作用可能是协同或相 加。目d目人们虽然已观察到三氧化二砷、艾叶油有一定|’穹治疗哮喘的作用，但列 两者联合雾化吸八应用的疗效观察及二者平喘机制盼研究较少。 凶此，本研究翻的是：观察雾化吸入不同剂量i氧化二砷及联合吸入不同剂 量艾叶油对哮嘣豚鼠嗜酸性粒细胞、TM／Th2大街、白三烯C4以及形态学的影 晌，探讨三氧化二砷、艾时浊治疗哮喘的机制；观察骞纯吸八li阉剂量三氧化二 砷及联合吸入不同剂量艾叶油对哮喘豚鼠心、肝、肾形态的彭响。 =、材料与方法 l实验动物 体重约(300_+50)g的雄性豚鼠60只，随机分为以下6组：i氧化二砷单 倍剂量组(A组)，三氧化二砷烈倍剂量婀(B组)，联合用药单倍剂量组(c组)， 联合用药双倍剂量组(D组)，阳性对照组(E组)，正常对照组(F组)。 2实验方法 2．1哮喘动物模型的制备 实验第1天以生理盐水lml，卵自蛋白(OVA)lOOmg，氢氧化铝(Al(oH)。)JOOmg 配威的效敏液腹腔注射致敏A组、B组、C组、D组、E缝豚鼠，F缎则仪以生理 盐水lml，AI(0H)。lOOmg配成的混悬液腹腔注射。实验第15天A组、B组、C 组、D组、E组豚鼠雾化吸入1％07A进行引喘。每天一次，连续8天。F组则仅 以生理盐水雾化吸入。 2 2药物处理 实验第16天开始A组、B组、C组、D组分别以不问的雾化帮量于gf喘前30m佃 雾化给药；E组、F组雾化吸入生理盐水。 2。3电镜改变 于末次抗振激发24小射后，处死豚鼠，随机取2只，取左上肺做电镜，观 察嗜酸细胞的凋亡和薪泡上皮的修复。 2．4收集支气管肺泡漓洗液(BALF) 每组另外的8只豚鼠处死后进行支气管肺泡灌洗，收集B乩F。将收集的BA[．F 混匀，离心(2000rpm，44C)lOmin，L清液分装于一80。C法箱中待测细胞困予IL 4、 IFN—Y及LTC4。用ELISA法测定上清中I L_4、IFN Y及LTC4水平，严格按试剂 II 三氧化二砷、艾叶油吸入防治哮喘的动物实验研究 三氧化二砷、艾叶油吸入防治哮喘的动物实验研究 中山火学硕士学位论文 盒说明书操作。采用白细胞计数法计数BALF中细胞总数。瑞氏染色后每片计数 200个有核细胞，计数嗜酸细胞(EOS)的个数，获得EOS的百分比。 2．5病理学检查 支气管肺泡灌洗后，取左下肺，做HE染色，观察EOS在肺内浸润的情况及 支气管平滑肌和基底膜的改变。每组随机取2只，取心、肝、肾，做HE染色， 观察心、肝、肾形态的变化。 3统计学处理 各组数据以均数±标准差(2-+S)表示，所有数据均用SPSSl3．0统 计学软件处理，以P(O．05认为差异具有统计学意义。 三、结果 1．各组豚鼠BALF中细胞总数的变化 E组BALF中细胞总数与其余各组比较均有统计学意义(pO．01)；A、B两组 之间比较有统计学意义(pO．01)，A组与C组比较有统计学意义(pO．01)，B组 与D组比较有统计学意义(pO．05)。 2．各组豚鼠BALF中嗜酸细胞的变化 E组BALF中细胞总数与其余各组比较均有统计学意义(pO．01)；A、B两组 之间比较有统计学意义(pO．01)，A组与C组比较有统计学意义(pO．01)，B组 与D组比较有统计学意义(pO．05)。 3．各组豚鼠BALF中IFN Y的变化 E组BALF中IFN—Y水平与其余各组比较均有统计学意义(pO．01)；用药四 组之间比较无统计学意义(pO．05)。 4．各组豚鼠BALF中IL一4的变化 E组BALF中IL一4水平与其余各组比较均有统计学意义(pO．01)；A、B两组 之间比较有统计学意义(pO．01)，A组与C组比较无统计学意义(pO．05)，B组 与D组比较无统计学意义(pO．05)。 5．各组豚鼠BALF中IFN—Y／IL一4比值的变化 E组BALF中IFN—Y／IL一4比值与其余各组比较均有统计学意义(pO．01)；A、 III 三氧化二砷、艾叶油吸^防治哮喘的翡物实验研究 三氧化二砷、艾叶油吸^防治哮喘的翡物实验研究 中山大学硕七学位皓文 B两组之间比较有统计学意义(p0．05)，A组与c组之间比较无统计学意义 (p0．05)，B组与D组之闯比较无统计学意义(pO．05)。 6．各组豚鼠BALF中LTC4的变化 E组BALF中LTC4水甲与其余各组比较均有统计学意义(pO．01)；A、8两组 之问比较无统计学意义(pO．05)，A组与c组比较有统计学意义(pO．01)，B组 与D组比较有统计学意义(pO。05)。 7．肺组织病理