重金属检验方法总则.DOCVIP

食品中動物用藥殘留量檢驗方法－抗生素及其代謝物多重殘留分析 100年12月14日署授食字第1001904693號公告訂定 1. 適用範圍：本檢驗方法適用於畜禽水產品中紅黴素（erythromycin）等16品項抗生素（見附表）之多重殘留分析。 2. 檢驗方法：檢體經萃取及淨化後，以液相層析串聯質譜儀（liquid chromatograph/tandem mass spectrometer, LC/MS/MS）分析之方法。 2.1. 裝置： 2.1.1. 液相層析串聯質譜儀： 2.1.1.1. 離子源：電灑離子化正離子（positive ion electrospray ionization, ESI+）。 2.1.1.2. 層析管：ACQUITY UPLC HSS T3，1.8 μm，內徑2.1 mm x 100 mm，或同級品。 2.1.2. 離心機（Centrifuge）。 2.1.3. 振盪器（Shaker）。 2.1.4. 均質機（Homogenizer）。 2.1.5. 氮氣蒸發裝置（Nitrogen evaporator）。 2.1.6. 固相真空萃取裝置（Solid phase extraction vacuum manifolds）。 2.1.7. 旋渦混合器（Vortex mixer）。 2.2. 試藥：甲酸、甲醇、乙腈及正己烷均採用液相層析級；偏磷酸、氫氧化鈉、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氯化鈉、乙二胺四乙酸二鈉（disodium ethylenediaminetetraacetic acid, disodium EDTA）及矽藻土均採用試藥特級；去離子水（電阻係數可達18 MW?cm以上）；roxithromycin內部標準品；紅黴素等對照用標準品共16品項。 2.3. 器具及材料： 2.3.1. 離心管：50 mL，PP材質。 2.3.2. 固相萃取匣（Solid phase extraction cartridge）：Oasis HLB，6 mL，500 mg，或同級品。 2.3.3. 濾膜：孔徑0.22 μm，PVDF材質。 2.4. 試劑之調製： 2.4.1. 0.2%偏磷酸溶液： 　　稱取偏磷酸2 g，以去離子水溶解使成1000 mL。 2.4.2. 2N氫氧化鈉溶液： 　　稱取氫氧化鈉8 g，以去離子水溶解使成100 mL。 2.4.3. 0.2%偏磷酸：甲醇（3:7, v/v）溶液： 　　取0.2%偏磷酸溶液與甲醇以3:7（v/v）混合，以2N氫氧化鈉溶液調整至pH 7。 2.4.4. 磷酸鹽緩衝溶液： 　　稱取相當於磷酸二氫鈉0.55 g、磷酸氫二鈉2.85 g及氯化鈉9 g，以去離子水溶解使成1000 mL。 2.4.5. 0.1M乙二胺四乙酸二鈉溶液： 　　稱取乙二胺四乙酸二鈉33.62 g，以去離子水溶解使成1000 mL。 2.4.6. 50%乙腈溶液： 　　取乙腈與去離子水以1:1（v/v）混合。 2.5. 移動相溶液之配製： 2.5.1. 移動相溶液A： 　　量取甲酸50 μL，加去離子水使成1000 mL，以濾膜過濾，取濾液供作移動相溶液A。 2.5.2. 移動相溶液B：乙腈。 2.6. 內部標準溶液之配製： 　　取roxithromycin約10 mg，精確稱定，以乙腈溶解並定容至10 mL，作為內部標準原液，貯存於-20℃。臨用時以50%乙腈溶液稀釋至0.05 mg /mL，作為內部標準溶液。 2.7. 標準溶液之配製： 　　取純黴素、林可黴素、clindamycin及orbifloxacin等抗生素對照用標準品各約10 mg，精確稱定，分別以50%乙腈溶液溶解；natamycin以甲醇溶解；其餘抗生素以乙腈溶解，並分別定容至10 mL，作為標準原液，貯存於-20℃。臨用時分別量取適量標準原液與內部標準溶液混合，以50%乙腈溶液稀釋至0.0005～1.0 mg/mL（含內部標準品濃度0.01 mg/mL），供作標準溶液。 2.8. 檢液之調製： 2.8.1. 肌肉： 2.8.1.1. 萃取： 　　將檢體細切均質後，取約2 g，精確稱定，置於離心管中，加入內部標準溶液200 μL，旋渦混合30秒鐘，靜置15分鐘。加入0.2%偏磷酸：甲醇（3:7, v/v）溶液10 mL，振盪10分鐘，以4000 rpm離心10分鐘後取上清液，殘留物加入磷酸鹽緩衝溶液10 mL，振盪10分鐘，以4000 rpm離心10分鐘。取上清液，合併兩次萃取液，再以4000 rpm離心10分鐘後，加入正己烷15 mL，振盪5分鐘，以4000 rpm離心5分鐘後取下層液，重複此步驟二次，取下層液供淨化用。 2