血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义.pptVIP

血细胞分析仪原理及散点图临床应用 一、血细胞各通道分析原理及散点图分析 二、散点图案例分析 一、血细胞各通道分析原理及散点图分析 血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究 参数，如直方图，DIFF散点图， NRBC散点图等。实验人员可根据这些信息从大量的标本中挑出需要重点关注的,进行涂片复检确认，提高工作效率，减少漏诊率。 DIFF WBC/BASO NRBC 半导体激光 荧光染色（聚次甲基+噁嗪 ） 主要原理 FSC前向散射光：细胞大小 SSC侧向散射光：复杂程度（细胞的颗粒 和细胞核等内含物的信息） SFL侧向荧光：核酸含量（DNA 、RNA) DIFF通道分析原理 4DL(阴离子表面活性剂）   完全溶解RBC PLT 在WBC膜上打孔 溶血素中加入有机酸，与嗜酸粒细胞内的碱 性蛋白粘附，使Eo颗粒的复杂程度增加，在 SSC显示复杂程度是最大的。 4DS 对核酸染色 纵坐标：侧向荧光（SFL） 反映核酸含量 横坐标：侧向散射光（SSC） 反映细胞内部复杂程度 化学粘附 大分子有机酸与嗜酸 粒细胞中的碱性颗粒 发生化学粘附 嗜酸粒细胞 大分子有机酸 RNA/DNA荧光染色原理 成熟白细胞：高荧光特性 网织红细胞：弱荧光特性 血小板： 成熟RBC： 原始细胞： 幼稚细胞： 微弱荧光特性 无荧光特性 极高荧光特性 极高荧光特性 荧光染色WBC分类的优势 检测异常细胞 提供幼稚粒细胞信息（IG） 提供原始细胞信息（Other） 10 S–FB溶血剂 （酸性，低渗） 溶解RBC PLT 除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成 裸核形态 Baso保持原状 纵坐标：前向散射光（FSC） 反映细胞大小 横坐标：侧向散射光（SSC） 反映细胞内部复杂程度 嗜碱 其它有 核细胞 嗜碱粒细胞溶血素为酸性低渗溶液， Baso内的蛋白为酸性蛋白，因此在该 溶液中受到保护，而其他有核细胞则被 溶解成裸核 WBC/BASO 通道分析原理 NRBC通道分析原理 NR溶血剂 完全溶解RBC，PLT WBC保持原状 NRBC溶解为裸核 NR染液对核酸染色 纵坐标：前向散射光（FSC）  反映细胞大小 横坐标：侧向荧光（SFL）  反映核酸含量 NRBC% = NRBC# / NRBC_WBC# 出现有核红时 WBC的修正 红系增生活跃时，外周血易见较多的NRBC，在WBC 计数时不被溶解，常被计入淋巴细胞中。 WBC增多对RBC计数的干扰 RBC：阻抗法RBC值含WBC WBC100*109/L时，需校正红系统参数 贫血越严重，对RBC影响越大 血红蛋白通道 光电比色法 SLS（十二烷基磺酸钠）：无氰无毒 二、散点图案例分析 嗜碱性粒细胞增多症 在BASO散点图上，嗜碱区 域出现大量散点，另外 DIFF散点图上，中性区域 的左下方也为嗜碱区域， 也出现了大量的散点。  BASO%：仪器13.4%  镜检13.5% AML-M1(例1) 不可信 DIFF散点图显示淋巴与单核之 间融合，有分类结果，但不可 信。 IMI散点图也提示大量原始细 胞。 镜检发现有77.5%的原始细胞。 细胞表面标志CD13和CD33阳 性，CD36阴性；为急性髓细 胞性白血病。 AML-M2 DIFF散点图显示白细胞完全融合 且不分类。 IMI散点图显示大量原始细胞和幼 稚粒细胞。 NRBC散点图：红色散点 镜检发现有90%的原始细胞、3% 的早幼粒细胞哦、1%中幼粒细胞。 流式细胞仪检测结果显示细胞表 面标志CD13和CD33阳性，为髓 细胞性白血病。 AML-M3 DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分 类。 IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒 细胞。 NRBC散点图：红色散点 镜检发现3%的原始细胞，91%的早幼粒 细胞、3.5%的中幼粒细胞，0.5%晚幼 粒细胞。 AML-M4 DIFF散点图，白细胞区域出现大量 灰白色散点，完全融合，不分类。 大致分成两群，一群为原始细胞， 一群为幼稚粒细胞。 IMI散点图也显示大量原始细胞和幼 稚粒细胞。 AML-M5b DIFF散点图淋巴与单核 融为一体，不分类，IMI 散点图显示大量原始细胞 和幼稚粒细胞。 镜检发现59%的原始细胞， 0.5%的早幼粒细胞，单 核细胞24.5%。 慢粒危象 DIFF散点图OTHER区域出现大 量散点，中性粒细胞上方也有少 量散点，IMI散点图也出现大量 红色散点，仪器报警提示有大量 原始细胞和幼稚粒细胞。 NRBC散点图：红色散点 镜检发现38.5%的原始细胞，幼 稚粒细胞和幼稚的单核细胞。酯 酶染色阴性或弱阳性，可被氟化 钠抑制。这是一例慢粒急单变。 MDS DIFF：淋巴细胞和单核细胞 之间界限不清，提示出现原 始细胞。中性粒细胞散点向 左下方延伸到嗜碱区域。 IMI：少