21第二十一章--药质量控制中现代分析方法的进展.pptVIP

* 第六节 液相色谱-核磁共振联用技术 一、方法特点 优点：使用范围广；可以判断化合物的结构等 缺点：灵敏度较低；易受溶剂等因素的影响等 * 二、基本操作模式 1、连续流动操作模式：随着色谱分离连续获得NMR 特点：NMR采样时间短，很难得到分辨率良好的NMR谱图 * 2、停流操作模式：当样品色谱峰最高点到达NMR液槽的中心位置时，停止流动，进行NMR采样分析，然后再启动输液泵，恢复正常HPLC分析，继续下一色谱峰的NMR测定。 特点：获得较好的NMR谱，但是易出现峰的扩散拖尾现象。 * 3、峰存贮操作模式：当检测到色谱峰时，将流出物收集并贮存到不同的毛细管回路内，由NMR逐一离线测定。 特点：即可获得分辨率高的NMR图，又可以避免峰扩散拖尾。 * * 第二十一章 药品质量控制中现代分析方法的进展 返回主目录 基本要求 第一节 毛细管电泳及其应用 第二节 超高效液相色谱及其应用 第三节 手性HPLC技术与应用 第四节 GC-MS技术与应用 第五节 LC-MS技术与应用 第六节 液相色谱-核磁共振联用技术 * 基本要求 熟悉药物分析主要新技术及其原理和特点 了解药物分析新技术的发展 * 第一节 毛细管电泳及其应用 毛细管电泳（CE）：又称高效毛细管电泳（high performance capillary electrophoresis，HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。包含电泳、色谱及其交叉内容，它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平，并使单细胞分析，乃至单分子分析成为可能。 优点：高效；高速；微量；低消耗 分离过程 电场作用下，毛细管柱中出现：电泳现象和电渗流现象。 带电粒子的迁移速度=电泳+电渗流；两种速度的矢量和。 阳离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出； 中性粒子无电泳现象，受电渗流影响，在阳离子后流出； 阴离子：两种效应的运动方向相反。ν电渗流 ν电泳时,阴离子在负极最后流出 除中性粒子外,同种类离子由于受到的电场力大小不一样也同时被相互分离。 电 泳 在电解质溶液中，位于电场中的带电离子在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象，称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同，迁移速率不同，可实现分离。 1808年，Reuss（俄国）首次发现电泳现象。 1937年，Tiselius（瑞典）用于人血清蛋白质混合液的分离： 发现样品的迁移速度和方向由其电荷和淌度决定； 第一次的自由溶液电泳；第一台电泳仪； 1948年，获诺贝尔化学奖； 电渗流 当固体与液体接触时，固体表面由于某种原因带一种电荷，则因静电引力使其周围液体带有相反电荷，在液-固界面形成双电层，二者之间存在电位差。 当液体两端施加电压时，就会发生液体相对于固体表面的移动，这种液体相对于固体表面的移动的现象叫电渗现象。 电渗现象中整体移动着的液体叫电渗流（electroosmotic flow ，简称EOF）。 一、毛细管区带电泳（CZE） 带电粒子的迁移速度=电泳和电渗流速度的矢量和。 正离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出； 中性粒子：无电泳现象，受电渗流影响，在阳离子后流出； 阴离子：两种效应的运动方向相反；ν电渗流 ν电泳时,阴离子在负极最后流出,在这种情况下,不但可以按类分离,同种类离子由于差速迁移被相互分离。 ； 最基本、应用广的分离模式，主要适用于离子状态存在的样品 缓冲溶液中加入离子型表面活性剂，其浓度达到临界浓度，形成一疏水内核、外部带负电的胶束。 二、 胶束电动毛细管色谱（MEKC） 在电场力的作用下，胶束在柱中移动。 2. 电泳流和电渗流的方向相反，且ν电渗流 ν电泳 ，负电胶束以较慢的速度向负极移动； 5.色谱与电泳分离模式的结合。 3.中性分子在胶束相和溶液（水相）间分配，疏水性强的组分与胶束结合的较牢，流出时间长； 4.可用来分离中性物质，扩展了高效毛细管电泳的应用范围； 三、毛细管凝胶电泳（CGE） 将聚丙烯酰胺等在毛细管柱内交联生成凝胶。 其具有多孔性，类似分子筛的作用，试样分子按大小分离。能够有效减小组分扩散，所得峰型尖锐，分离效率高。 特点：抗对流性好，散热性好，分离度极高。 主要用于蛋白质、DNA等生物大分子 * （四）毛细管等速电泳 采用前导电质和尾随电解质，在毛细管中充入前导电质后进样，电解槽中换用尾随电解质进行电解分析，带不同电荷