硫化氢对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用-生理学专业论文.docxVIP

:; ill i ili 、 目 目 录 中文摘要 1 英文摘要 0 0 4 研究论文硫化氢对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用 前1言······00胃U舌””” 0·······“一””一 ···””一““”””””一“”···················· “””-··-· ·······7”””， 材料与方法 8 结果····· ··· ································· ······················13 附图 o o 16 附表 33 讨论························· ······································· ··37 结j沧·· ······················· ··· ········0 06··················42 参考文献 43 综述硫化氢对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制探究Q 047 致谢 58 个人简历 0 6 59 中文摘要硫化氢对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用 中文摘要 硫化氢对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用 摘 要 目的：硫化氢(hydrogen sulfide，H2S)是一种无色具有臭鸡蛋气味的 气体。由于大量吸入会引起人体多组织器官的损害甚至死亡，所以其毒性 一直受人们的关注。直到20世纪90年代后期，科学家证实人体内部可以 内源性产生H2S，并且研究证实生理浓度的H2S在神经系统、循环系统等 都具有多种的生理及病理生理调节保护作用。H2S成为了继一氧化氮 (nitric oxide，N0)，一氧化碳(carbon monoxide，C0)之后被发现的第三 种新型的气体信号分子。对H2S的研究成为当前生命科学领域的崭新课 题。心肌缺血再灌注(myocardial ischemia／reperfusion，MIR)是指心肌在 短时间内出现血供中断，并在一定时间内恢复血供。而心肌缺血再灌注损 伤(myocardial ischemia／reperfusion injury，MIRI)是指在MIR后原缺血 心肌发生了较供血恢复前更为严重的损伤。在临床治疗当中，MIRI作为 心脏血管外科手术(冠状动脉再通术、先天性心脏病纠治术、心脏瓣膜置 换术等)后的一个重要并发症及致死原因之一而引起人们广泛关注。研究 发现，无论内源性产生或是外源性给予生理浓度H2S均能够降低MIRI， 保护缺血心肌。为了进一步证实H2S是否对MIRI具有保护作用，以及探 讨其作用机制，本研究通过建立在体大鼠心肌缺血再灌注的动物模型，给 予外源性H2S预处理和缺血预处理，观察H2S及缺血预处理对缺血再灌 注心肌的功能和形态上的影响，并探讨其可能的机制。 方法：选用270．360 g雄性SD大鼠60只，随机分为两部分各30只。 麻醉后开胸，在左冠状动脉前降支下穿线制备在体心肌缺血再灌注动物模 型。每部分再分别按照下列步骤分成五组：(1)缺血组MIR．-心肌缺血 30 min，再灌注120 min；(2)NaHS+MIR组：在MIR前5 min给予NariS (2．8 rtmol／kg，／v)；(3)预缺血(IP)+MIR组：缺血5 min再灌注5 min， 重复3次后按(1)组步骤进行；(4)格列苯脲(Gli)+N出S+MIR组： 在步骤(2)之前5 min给予Gli(5 mg／kg，如)；(5)内源性硫化氢合酶 中文摘要抑制剂炔丙基甘氨酸(PPG)+MR组：PPG(33．9 中文摘要 抑制剂炔丙基甘氨酸(PPG)+MR组：PPG(33．9 mg．k91．day～，／p)连续 注射6天后重复步骤(1)。第一部分30只大鼠用于测定心率和血压以及 心肌梗塞范围，心肌缺血区和梗塞区分别用伊文思蓝和氯化硝基四氮唑蓝 染色确定，心肌梗塞范围定义为心肌梗塞区重量占心肌缺血区重量的百分 比。第二部分30只大鼠用于测定心肌细胞凋亡蛋白Bax和Bcl．2的表达 及凋亡率；血浆H2S水平的变化；心肌H2S合成酶CSE的表达以及电镜 下心肌组织病理的改变。 结果：(1)在心肌缺血30min和再灌注120 min过程中，梗塞心肌占 缺血心肌的54．83+1．21％。预先应用硫化氢外源性供体(2．8 gmol／kg，柳 可使心肌梗塞范围减少到34．32士1．38％(萨O．001)。预先应用非选择性KATP 通道阻断剂格列苯脲(5 mg／kg，／v)能完全取消外源性硫化氢对缺血．再 灌注心肌的保护作用。预先应用内源性硫化氢合酶抑制剂炔丙基甘氨酸 (PPG 33．9 mg．k百1．day～，／p)后，心肌梗塞范围明显增大(萨O．05)。 (2)NaHS+MIR组与Gl