利用果蝇模型研究神经系统发育及疾病-发育遗传学专业论文.docxVIP

致谢感谢李昌本教授和赵寿元教授为我提供了赴美国耶鲁大学医学院遗传 致谢 感谢李昌本教授和赵寿元教授为我提供了赴美国耶鲁大学医学院遗传 学系完成论史的机会。 本丈是我在耶鲁大学医学院许田实验室三年的工作总结。感谢我的导 师许田博士和李昌本教授在学习、工作和生活等各方面对我的关心和指导。 他们对科学的献身精神和严谨态度使我受益菲浅。没有他们，完成本文是不 可能的。 感谢许田实验室的同事们对我的关心。黄河博士向我传授了丰富的果 蝇遗传学知识。王伟毅、张胜、费晓岚、JennyRooky博士、陈伟丽、于皖、 ChristopherJ Potter、陶无凡博士、李大鸣博士、NicoleNapier博士、Reza Yavari博士、MaieSt John博士、RodneyStewart博士、JanetLee(李美华)博 士、杨小龙博士、GregoryTurenehalk、AnaQuioness、RaymondPagliarini、郝 雅薇、KristinaSepanek等也为我完成论文提供了巨大的帮助。 感谢Newklmen的朋友们在三年里为我带来的欢乐。杨哲蓓、高铃平、 马维列博士、陈伟博士、张继军、杜立林、董梦秋、李嵩、严健、武玲玲博士、 肖昌寿、郑良彪博士等为我提供了不少帮助。 感谢复旦大学遗传所的老师和同学们对我的帮助。柴建华教授和魏勇 博士帮助我在出国前的三年硕士期间掌握了许多分子生物学和遗传学知识。 乔守怡教授、应蓓蓓老师、顾慧娟老师和邓可京博士为我返校后的工作提供 了方便。喻红老师、林丽珠老师、陈眷妹老师、程秋应博士、周伟国博士、吴 昊泉博士、李瑶博士、赵新燕博士、吴学军博士、李瑶博士、康琳、廖珊、冯 丽冰、邵轶虹、蔡静莉、王蓉、甘波谊、王舫、康毅滨、徐颍之、刘立、刘木 根、金磊、朱化星、王丰、张坚、刘旭、卢剐、徐天宏、徐蓉、陈竣、潘峰、黄 昕、何艺园、何有裕等同学都为我提供了方便。 感谢我的父母吴建屏和叶世德、我的姐姐吴晓竹、特别是我的妻子孙 磷，他们的鼓励和支持始终是我前进的巨大动力。 王伟毅参加了部分筛选kuz调节基因的工作；费晓岚承担了绝大多数 显微注射的任务；JennyRooke博士提供了娩基因组DNA克隆：张胜提供了 野生型和突变型luan基因eDNA及转基因果蝇；孙小红博士提供了果蝇 GAPDH基因eDNA；Davies博士提供了人tTG基因eDNA，Tom博士提供了 1Q单克隆抗体；赵寿元教授、黄河博士、王伟毅、康琳等参与审阅了论文草 稿并提出了宝贵意见；对他们的帮助再次表示感谢。 摘要f黑腹果蝇是了解最深入的模式生物之一。丰富的遗传学背景知识和技 摘要 f黑腹果蝇是了解最深入的模式生物之一。丰富的遗传学背景知识和技 术、适中的复杂性，以及分子水平上和人的极端相似性，使果蝇非常适宜于 作为研究发育生物学和人类疾藕的模型。本文对此进行了探索。 Notch信号转导途径在果蝇和人体内细胞的局部相互作用中处于中心 地位。Notch信号转导异常可以严重干扰果蝇的发育。在人体内，Notch信号 转导异常与包括癌症在内的疾病发生相关。然而，人们对Nach信号转导的上 游调节机制还没有多少了解：)最近，许田实验室克隆了果蝇金属蛋白酶基因 kuzbanian(kuz)。kuz基因失活突变和Notch信号转导减弱造成的表型相似，便 人们认为kuz基因可能在Notch信号转导过程中发挥功能。本文报道了一些 kuz等位基因，为研究施基因的功能提供了方便。另外，根据能否改变突变 型kuz基r霜(kuzDN)在器官芽中过量表达引起的表型，我们对2383个P因子插 入突变进行了遗传筛选。随些P因子突变覆盖了果蝇25％的必须基因。我们 发现编码Notch㈣蛋白主要配体的Delta(DO基因是kuz的一个调节基因。 lac_DN的表型可以被例基因失活突变增强，也可以被D『基因剂量的增加所抑 制。这些遗传学实验结果与有关生物化学实验数据一起显示Kuz金属蛋白酶 可以加工N蛋白的配体Dl，从而充当Notch信号转导的上游调节者。遗传筛 选中发现的其他基因也为进一步研究kuz基因的功能提供了线索。．： 巴知8种人类神经退行性疾藕与基因产物中谷氨酰胺重复的扩增有 关。我们通过表达一段几乎全由谷氨酰胺组成的多肽建立了一个多聚谷氨酰 胺病的果蝇模型。利用这个模型，我们发现多聚谷氨酰胺肽本身可以引起神 经退行性变化，而同时表达转谷氨酰胺酶可以抑制这个过程．在此基础上的 进一步研宄表明神经退行性表型只有当多聚谷氨酰胺肽存在于细胞核中时才 会产生，而细胞质定位的多聚谷氨酰胺肽没有该功能。／这表明细胞核定位对 多聚谷氨酰胺病的发生起关键作用。细胞膜定位的多聚谷氨酰胺肽能够干扰 正常的发育过程，但对神经退行性变化没有影响。、1 4 AbstractThe Abst