离心淘洗技术应用于分离大鼠肝脏非实质细胞亚群的实验研究-内科学(消化)专业论文.docxVIP

上海第二医科大学临床型博d：gF究生论文离心淘洗技术应用于分离大鼠肝脏 上海第二医科大学临床型博d：gF究生论文 离心淘洗技术应用于分离大鼠肝脏 非实质细胞亚群的实验研究 中文摘要 肝脏细胞分为实质细胞和非实质细胞两大类，其中非实质细胞包括肝星状细 胞(HSCs)、肝窦内皮细胞(SECs)、Kupffer细胞等。这些细胞在肝脏正常功能的维 持和肝脏病变过程中，都发挥了各自的作用。为了在体外研究肝脏各类细胞确切 的功能和病理生物学特性，需要采用合适的分离技术来获取高纯度和活力的足量 细胞。 我实验室在十余年的肝脏细胞研究中，已掌握肝细胞、HSCs和Kupffer细胞 的分离培养方法并对它们进行了深入研究。但是由于SECs和Kupffer细胞的密 度相近，单用密度梯度离心法很难将两者分离开来，且SECs对培养条件要求苛 刻，故在SECs的分离纯化和培养上一直存在困难。根据SECs和Kupffer细胞直 径的差异(SEC直径为99m，Kupffer细胞直径为121am)，可采用离心淘洗方法。 离心淘洗技术是一种公认的获得高纯度细胞群的好方法，它根据反向流动离心原 理设计，在保持离心力不变的情况下，通过增加淘沈液的流速获得的向心力的增 加迫使各类细胞根据其不同的沉降速度离开淘洗室，从而使细胞亚群分离丌来。 该技术的开展应用需有特定的设备和实验者熟练的操作技能，因此，在国内一直 无离心淘洗技