人肺腺癌A549干细胞球和A549细胞系线粒体融合蛋白表达的分析.pdfVIP

Abstract be inresistancemechanismsthatcontributetocarlcer A549cell involved spheresmay stemcells． stem tumors；cancer bodies；mitochondria； Keywords：Lung cells；spherical mitochondrialfusion protein 目录 目录 第1章引言…………………………………………………………………………1 第2章材料与方法…………………………………………………………………4 2．1实验材料……………………………………………………………………4 2．1．1实验细胞株…………………………………………………………一4 2．1．2主要试剂及来源……………………………………………………．．4 2．1．3主要仪器和设备……………………………………………………一5 2．1．4主要试剂配制………………………………………………………一6 2．2实验方法……………………………………………………………………8 2．2．1细胞的培养及分组…………………………………………………一8 2．2．2 2．2．3蛋白免疫印迹法检测两组细胞的线粒体融合蛋白Mfnl、Mfn2、 Opal的蛋白表达…………………………………………………………12 2-3统计方法…………………………………………………………………．．15 第3章结果………………………………………………………………………．．16 3．1人肺腺癌A549细胞及A549细胞球培养的形态观察…………………16 3．2 RT-PCR法检测结果……………………………………………………一16 3．2．1RT-PCR方法检测两组细胞线粒体融合蛋白MfnlmRNA表达…17 3．2．2RT-PCR方法检测两组细胞线粒体融合蛋白Mfn2mRNA表达…18 3．2．3 mRNA表达…19 RT-PCR方法检测两组细胞线粒体融合蛋白OPAl 3．3蛋白免疫印迹法检测结果………………………………………………一20 3．3．1蛋白免疫印迹法检测两组细胞线粒体融合蛋白Mfnl蛋白表达一20 3．3．2蛋白免疫印迹法检测两组细胞线粒体融合蛋白Mfn2蛋白表达．．2l 3．3-3蛋白免疫印迹法检测两组细胞线粒体融合蛋白OPAl蛋白表达．22 第4章讨论………………………………………………………………………一23 4．1肿瘤干细胞耐药机制……………………………………………………一23 4．2线粒体融合的研究进展…………………………………………………．．24 V 目录 4．3肺癌干细胞研究进展及干细胞面临的挑战……………………………．．26 4．4实验思路和方法的完善……………………………………………………27 第5章结论与展望………………………………………………………………28 5．1结论………………………………………………………………………一28 5．2展望…………………………………………………………………………28 致谢………………………………………………………………………………．．29 参考文献……………………………………………………………………………30 攻读学位期间的研究成果…………………………………………………………33 综述…………………………………………………………………………………………