细胞毒活性海洋放线菌的筛选与两株目标菌株次级代谢产物的分析.pdfVIP

细胞毒活性海洋放线菌的筛选及两株目标菌株次级代谢产物的研究 细胞毒活性海洋放线菌的筛选及两株目标菌株次级代谢产物 的研究 摘要 海洋放线菌生存环境特殊复杂，其次级代谢产物结构新颖、种类繁多，是新 结构活性化合物的重要来源。为了寻早结构新颖的活性化合物，本论文采用活性 追踪的方法开展了海洋放线菌的抗肿瘤活性筛选及2株海洋放线菌次级代谢产物 的研究工作。内容包括：海洋放线菌的分离与抗肿瘤活性筛选；活性菌株的初步 评价及抗肿瘤活性成分的追踪分离；单体化合物的结构解析；单体化合物抗肿瘤 活性的初步评价。 从威海、福建沿海海泥样品及广东红树林根部泥样共lO个样品中，分离得到 放线菌262株。采用海虾生物致死法和抑菌试验相结合的一级筛选、K562细胞的 流式细胞术的二级筛选模型，以细胞周期抑制和细胞凋亡诱导以及坏死性细胞毒 为活性指标，对这262株放线菌进行活性筛选，获得活性菌株17株。对17株活 性菌株和另外一株实验室保藏的活性菌株共18株放线菌进行了稳定性试验和化学 筛选的初步评价，获得了12株具有良好稳定性的放线菌。其中Will一2216-6和 THW-7用TLC和HPLC进行的化学评价表明存在系列结构类似物。选定这两株菌 作为本论文的研究对象。 在考察了目标菌株的培养条件后，对2株目标活性菌进行了大量发酵。对发酵 产物运用萃取，薄层层析，正相、反相硅胶柱层析，LH-20凝胶柱层析，反相高 压液相等化学的分离纯化手段，采用人慢性髓性白血病细胞硒62的镜检结合流式 细胞术的筛选模型。进行活性追踪分离。从WHl-2216-6的次级代谢产物中分离 到6个单体化合物(14-15、18、20、2．；-24)共24个化合物。 反应的方法(酯化反应等)阐述了其中20个化合物的化学结构(化合物结构及名 1)，其中新化合物3个(1-3)。所得的化合物主要是含氮类化合物及 称参见Table 细胞毒活性海洋放线菌的筛选及两株目标菌株次级代谢产物的研究 苷及碱基2个(18、22)，苯的衍生物5个(9-13)。 利用MTr法、SRB法，对分离获得的单体化合物的抗肿瘤活性进行了初步 碱抗肿瘤活性的报道。 本文对两株海洋放线菌的次级代谢产物进行了系统研究，共分离鉴定了20个 F、 G；较高活性化合物5个；提供了一株能特征产生毗啶类生物碱的 caerulomycine 放线菌。这～研究丰富了海洋天然产物的结构类型，为抗肿瘤新药的筛选提供了 活性化合物及活性菌株。 关键词：海洋放线菌，次级代谢产物，抗肿瘤，活性追踪分离，吡啶类生物 碱 2 细胞毒活性海洋放线菌的筛选及两株目标菌株次级代谢产物的研究 Table1Structureof compounds l G caerulomycine neW 蹬11 2 F caerulomycine n钾 曦N H 3 H1 jcaerulomycine nl?-r 曦H 4 D