血清总蛋白测定(双缩脲试剂法).doc

生物化学实验报告 姓 名： 学 号： 专业年级： 组 别： 生物化学与分子生物学实验教学中心 实验名称 血清总蛋白测定（双缩脲试剂法） 实验日期 FORMTEXT 2014-11-21 实验地点 第五实验室 合作者 指导老师 评分 教师签名 批改日期 一、实验目的 1、掌握双缩脲测定血清总蛋白的基本原理、操作； 2、熟悉血清总蛋白的临床意义； 3、了解双缩脲法测定血清总蛋白的特点和注意事项。 二、实验原理 （一）：双缩脲反应 在碱性溶液中,双缩脲(H2NOC－NH－CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。两分子尿素加热脱氨缩合成的双缩脲（H2N-OC-NH-CO-NH2），因分子内含有两个邻接的肽键，在碱性溶液中可与Cu2+发生双缩脲反应 ，生成紫红色络合物；蛋白质分子含有大量彼此相连的肽键（-CO-NH-），同样能在碱性条件下与Cu2+发生双缩脲反应，生成的紫红色络合物，且在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在10～120g/L范围内有良好的线性关系。 材料与方法： 实验材料 样品：大牛血清 试剂：双缩脲试剂、蛋白质标准液（70g/L）、生理盐水（0.9%） 器材：试管、加样枪、刻度吸管、洗耳球 设备：1100分光光度计、水浴锅 实验步骤 取3